紅江橙嵌合體及其衍生材料的遺傳背景分析.pdf

1、紅江橙(CitrussinensisOsbeckcv.'Hongjiangcheng')是廣東省著名的優(yōu)良甜橙品種，具有早結、豐產、質優(yōu)等優(yōu)點，曾是閩南和湛江地區(qū)的主栽品種。由于紅江橙為嫁接嵌合體，其無性繁殖后代的果實性狀會出現分離(可分離為橙型紅肉果、紅黃肉嵌合果、橙型黃肉果、橘橙嵌合果、橘變果)。研究紅江橙嵌合體的遺傳背景和分離規(guī)律，是進一步弄清其嵌合機理，為植物的人工嫁接產生嵌合體，進而創(chuàng)造果樹嵌合體育種方法的重要基礎。

2、本研究通過體胚培養(yǎng)獲得紅江橙單細胞起源的植株，并利用SSR、ISSR、RAPD分子標記對紅江橙3種分離類型及其實生植株、體胚植株的遺傳背景進行了分析，探討了各類型紅江橙的遺傳組成及嵌合情況，獲得的主要研究結果有： 1.以不同類型的紅江橙(橙型紅肉果、橙型黃肉果、橘變果)果實的枝條上葉片基因組DNA為模板，從22對SSR引物中篩選出7對多態(tài)性引物，從5個ISSR引物中篩選出3個多態(tài)性引物，從9個RAPD引物中篩選出2個多態(tài)性引物，

3、用于實生后代及紅江橙體胚培養(yǎng)的幼苗的遺傳分析。 2.用多態(tài)性SSR引物對橙型紅肉果、橙型黃肉果、嵌合橘變果、橘變果的實生群體進行遺傳分析，發(fā)現各類型實生后代的電泳圖譜相同，并且與橙型黃肉果的電泳圖譜一致。多態(tài)性RAPD引物和ISSR引物也能得到相同或相似的試驗結果，表明各分離類型的實生后代均為橙。 3.分別以紅江橙成熟果實的飽滿種子、敗育胚、花后4～8周的幼嫩胚珠為外植體，進行了體細胞植株誘導的研究。研究發(fā)現各種外植體均

4、能誘導出植株，但發(fā)育途徑不同?；ê?～8周的幼嫩胚珠誘導周期最短，大多直接發(fā)育成胚狀體，再轉化成植株。敗育胚則在接種后40天左右長出大量胚性愈傷，培養(yǎng)2～3個月左右長出大量胚狀體，繼而轉化成植株。飽滿種子誘導周期過長，獲得的體細胞植株數量極少。幼嫩胚珠含合子胚可能性比敗育胚大。因此，從試驗周期及試驗目的看，敗育胚為最佳外植體。 4.將體胚途徑產生的紅江橙幼苗基因組DNA與3種分離果的紅江橙枝條上的葉片基因組DNA、4種分離果的實

5、生苗后代的基因組DNA一起進行SSR、ISSR、RAPD標記分析，結果表明，除橘變果的體細胞植株外，其余體細胞植株的電泳圖譜均與黃肉果及實生苗的電泳圖譜相同或相近，主要擴增條帶相同；橘變果體細胞植株的擴增圖譜在特定位點缺少一條擴增片段。結果表明，橘變果的體細胞植株已完全與橙型類型植株在遺傳上分離，而橙型果的體細胞植株保持著與橙相同的遺傳背景。 5.總結實生群體與組培誘導苗的遺傳鑒定結果，發(fā)現各類型紅江橙實生后代電泳圖譜相同；且與