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文檔簡介
1、前言:細(xì)胞周期蛋白是真核細(xì)胞周期循環(huán)中主要的調(diào)節(jié)因子,在人類腫瘤細(xì)胞中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)多種細(xì)胞周期蛋白的異常表達(dá)。CyclinG是細(xì)胞周期蛋白家族中發(fā)現(xiàn)較晚的新成員,cyclinG1和cyclinG2在結(jié)構(gòu)上具有高度同源性,但在功能上似乎各自發(fā)揮著其特有的生物學(xué)功能。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化(S-P)方法檢測(cè)cyclinG1、G2蛋白在32例卵巢漿液性囊腺癌和26例卵巢漿液性囊腺瘤組織中的表達(dá)情況,探討cyclinG1、G2蛋白表達(dá)與卵巢漿液性囊腺癌
2、的可能相關(guān)性。 材料與方法1.標(biāo)本:32例卵巢漿液性囊腺癌和26例卵巢漿液性囊腺瘤組織標(biāo)本來自中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科,經(jīng)病理切片確診。 2.免疫組化染色:免疫組化(S-P)法,以細(xì)胞核和/或胞漿呈棕黃色染色為陽性表達(dá),在高倍顯微鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,陰性結(jié)果為染色細(xì)胞數(shù)<5%。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:所得數(shù)據(jù)應(yīng)用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果免疫組化染色結(jié)果:cyclinG1蛋白表達(dá)陽性部位位于細(xì)胞核,而
3、cy-clinG2位于細(xì)胞核和胞漿中。在卵巢漿液性囊腺癌和卵巢漿液性囊腺瘤中cyclinG1蛋白表達(dá)陽性百分比分別為84.38%(27/32)和30.77%(8/26);cyclinG2分別為21.88%(7/32)和61.54%(16/26)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果提示cyclinG1、cyclinG2蛋白在卵巢漿液性囊腺癌及卵巢漿液性囊腺瘤中表達(dá)差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01),可見cyclinG1蛋白在卵巢漿液性囊腺癌中表達(dá)增高,而c
4、yclinG2蛋白表達(dá)減低。 討論CyclinG1基因由Tamura等于1993年發(fā)現(xiàn),定位于5q32-34,第一個(gè)內(nèi)含子中有p53蛋白結(jié)合位點(diǎn)。CyclinG1蛋白主要定位于細(xì)胞核,目前研究表明在骨胳肌中表達(dá)水平最高,其次在卵巢、腎臟和結(jié)腸組織中也有較高水平的表達(dá)。但cyclinG1并非為細(xì)胞增殖負(fù)性調(diào)節(jié)因子。在部分骨肉瘤中cyclinG1呈高表達(dá),cyclinG1反義RNA表達(dá)減緩骨肉瘤細(xì)胞增殖,有促進(jìn)細(xì)胞增長作用。此外,S
5、mith等將cyclinG1cDNA導(dǎo)入人大腸癌細(xì)胞和正常人成纖維細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)cyclinG1表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞增殖。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示cyclinG1蛋白在卵巢漿液性囊腺癌組織中表達(dá)增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CyclinG1的持續(xù)性高水平表達(dá),對(duì)p53的轉(zhuǎn)錄活性反應(yīng)遲鈍。過多的cyclinG1通過與PP2A結(jié)合使MDM2去磷酸化,促進(jìn)MDM2介導(dǎo)的p53泛素化,加速p53的降解,從而表現(xiàn)為對(duì)p53的負(fù)反饋?zhàn)饔?,抑制?xì)胞的凋亡,導(dǎo)致腫瘤細(xì)
6、胞無限制增長。CyclinG1蛋白的改變可能與卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。應(yīng)用順鉑、阿霉素等藥物處理細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)G2/M期阻滯的細(xì)胞比例與cyclinG1的表達(dá)明顯正相關(guān),推測(cè)cyclinG1可能與細(xì)胞周期G2/M檢查點(diǎn)調(diào)控有關(guān)。CyclinG1過表達(dá)的細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素等藥物的細(xì)胞毒性更加敏感,可用于卵巢癌化療藥物篩選。 Horne等首先報(bào)道了cyclinG2基因克隆,其蛋白主要定位在細(xì)胞質(zhì)中。Bates等的研究表明c
7、yclinG1和cyclinG2的mRNA表達(dá)都能被DNA損傷藥物放線菌素D誘導(dǎo),不同的是對(duì)cyclinG2的誘導(dǎo)表達(dá)呈p53非依賴性。當(dāng)B細(xì)胞的增殖受抑制或發(fā)生細(xì)胞周期阻滯時(shí),cyclinG2轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)。Wykoff等將抑癌基因VHL重新導(dǎo)入已存在該基因缺陷的腎癌細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因誘導(dǎo)表達(dá)的一系列靶基因中包括cyclinG2。KimY等在人口腔癌中檢測(cè)到cyclinG2基因表達(dá)的減低。劉潔等應(yīng)用腺病毒載體轉(zhuǎn)染胃腺癌細(xì)胞系SGC-790
8、1,cyclinG2基因抑制其增殖作用。本研究中cyclinG2蛋白在卵巢漿液性囊腺癌中表達(dá)減低,與上述研究結(jié)果一致,均表明cyclinG2可能是細(xì)胞周期的負(fù)性調(diào)控因子。卵巢漿液性囊腺癌中cyclinG2蛋白表達(dá)減低提示其可能與卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制相關(guān)。 結(jié)論:1.卵巢漿液性囊腺癌中cyclinG1蛋白表達(dá)增高提示其可能與卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制相關(guān),并可用于卵巢漿液性囊腺癌化療藥物篩選。 2.卵巢漿
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