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1、原始生殖細(xì)胞(Prmordial germ cells,PGCs)是生殖細(xì)胞的祖細(xì)胞,存于8.5—13.5dpc(days post coitum)的鼠胚,具有遷移、增殖和性別分化等特性.近年研究證明PGCs發(fā)育過程中發(fā)生著大量的DNA及組蛋白的修飾,說明PGCs的特性可能與表觀遺傳修飾相關(guān),從組蛋白變體角度分析是表觀遺傳學(xué)研究新的熱點.本實驗通過間接免疫熒光檢測了不同發(fā)育時期舍有PGCs的組織石蠟切片、單細(xì)胞及培養(yǎng)兩天的PGCs中組蛋
2、白H2A三種變體-macroH2A、H2A.X和H2A.Z的分布.研究結(jié)果如下: 1.免疫熒光檢測小鼠PGCs中組蛋白H2A變體的分布 分別采集8.5-13.5dpc五個時間段的含有PGCs的胚胎組織和PGCs單細(xì)胞,對組織進(jìn)行石蠟切片間接免疫熒光,對單細(xì)胞進(jìn)行間接免疫熒光檢測.macroH2A在PGCs進(jìn)入生殖嵴(10.5dpc)和性別分化以后(13.5dpc),分布狀態(tài)發(fā)生變化;H2A.X在性別分化后(13.5dpc
3、)分布發(fā)生變化;H2A.Z在進(jìn)入生殖嵴和性別分化過程中(12.5dpc)及以后(13.5dpc)分布發(fā)生變動.說明組蛋白H2A的這三種變體確實參與了PGCs的發(fā)育。 2.免疫熒光檢測培養(yǎng)后PGCs中組蛋白H2A變體的分布 采集主要時間段的小鼠PGCs體外培養(yǎng)兩天,分別將體外培養(yǎng)1d和2d的PGCs通過間接免疫熒光檢測組蛋白H2A三種變體的分布,以體內(nèi)同期的PGCs做標(biāo)準(zhǔn)對照,結(jié)果發(fā)現(xiàn):macroH2A的分布在培養(yǎng)的細(xì)胞中
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