人原始生殖細(xì)胞來(lái)源的肝臟細(xì)胞.pdf

1、　　本研究由4～7周胚胎中分離出人PGC，在體外培養(yǎng)下形成表達(dá)人EG細(xì)胞標(biāo)志的細(xì)胞集落；對(duì)PGC原代培養(yǎng)集落進(jìn)行誘導(dǎo)，產(chǎn)生增殖能力較強(qiáng)、具有向三胚層分化潛能的原始生殖細(xì)胞來(lái)源的前體細(xì)胞系(PGCP)；將PGCP細(xì)胞系移植入胎羊體內(nèi)，觀察其在胎羊體內(nèi)向肝臟細(xì)胞分化的潛能。本論文分為三部分：第一部分，人原始生殖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定。由4～7周人流產(chǎn)胚胎的腸系膜及生殖嵴分離出人PGC細(xì)胞。第二部分：人PGC細(xì)胞來(lái)源的PGCP細(xì)胞系。經(jīng)RT

2、-PCR檢測(cè)人EG細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)陽(yáng)性的原代培養(yǎng)細(xì)胞集落，在EBM-2培養(yǎng)液中誘導(dǎo)培養(yǎng)，建立PGCP細(xì)胞系。第三部分：PGCP細(xì)胞在胎羊體內(nèi)向肝臟細(xì)胞的分化。在B超引導(dǎo)下經(jīng)皮穿刺，將0.3～3×107的PGCP細(xì)胞移植入發(fā)育40～70天胎羊的腹腔/肝臟內(nèi)。 結(jié)論：1.由早期胚胎分離出的人PGC細(xì)胞，體外培養(yǎng)可形成表達(dá)人EG細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志的細(xì)胞集落。2.本實(shí)驗(yàn)室建立的PGCP細(xì)胞系，在體外培養(yǎng)條件下有較強(qiáng)的增殖能力和向多胚層