肺癌射頻消融后CD4+T細(xì)胞亞群變化及其臨床意義的初步探討.pdf

1、汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文I中文摘要目的初步研究正常人群外周血CD4T細(xì)胞亞群Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞的水平和肺癌射頻消融（Radiofrequencyablation，RFA）治療后CD4T細(xì)胞亞群的變化，通過對照分析初步探討CD4T細(xì)胞亞群變化的臨床意義。材料與方法選擇30例健康人作為正常對照組，根據(jù)肺癌患者在各年齡段及性別分布比例確定對照組各年齡段的男女例數(shù)，于清晨空腹抽取外周靜脈血進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測。6例經(jīng)皮穿刺病

2、理活檢證實為肺癌的患者，采用氣管插管下靜脈麻醉，在CT引導(dǎo)下行RFA治療，分別于治療前及治療后半月、1月、2月、3月清晨抽取空腹外周靜脈血進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測。Th1、Th2、Th17細(xì)胞的代表因子分別是IFNγ、IL4、IL17，采用全血胞內(nèi)染色法檢測細(xì)胞因子間接分析Th1、Th2、Th17細(xì)胞水平，用佛波酯(PMA)、離子霉素(Ionomycin)刺激細(xì)胞因子表達(dá)，并用蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑（BrefeldinA，BFA）阻斷其分泌到胞外，以

3、熒光素偶聯(lián)的單克隆抗體CD3—PECy5、CD8—APCCy7、IFNγ—APC、IL17—FITC及IL4—PE對細(xì)胞表面抗原及胞內(nèi)細(xì)胞因子直接標(biāo)記，染色后用BDFACSCanto流式細(xì)胞儀測定各項指標(biāo)，以FACSDiva軟件分析Th1、Th2、Th17細(xì)胞占CD4T細(xì)胞的百分率。Treg細(xì)胞的特征表型分子是CD3CD4CD25foxp3，轉(zhuǎn)錄因子foxp3是位于細(xì)胞內(nèi)部的特征性表型分子，采用全血胞內(nèi)染色法檢測胞內(nèi)抗原分子以分析Tre

4、g細(xì)胞水平，以熒光素偶聯(lián)的單克隆抗體CD3—APC、CD4—PECy5、CD25—FITC及foxp3—PE對細(xì)胞表面及胞內(nèi)抗原分子直接標(biāo)記，染色后用BDFACSCanto流式細(xì)胞儀測定各項指標(biāo)，以FACSDiva軟件分析Treg細(xì)胞占CD4T細(xì)胞的百分率。正常健康人檢測結(jié)果采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計描述分析；6例肺癌RFA治療術(shù)前、術(shù)后CD4T細(xì)胞亞群水平直接采用平均數(shù)進(jìn)行趨勢分析。結(jié)果正常人群外周血Th1、Th2、Th17