芒果苷對哮喘小鼠CD4+T細胞亞群及其細胞因子影響的實驗研究.pdf

1、目的：運用卵白蛋白（OVA）致敏和激發(fā)的方法建立過敏性哮喘小鼠模型，觀察芒果葉提取物——芒果苷治療過敏性哮喘的藥效作用，并進一步探討芒果苷對哮喘小鼠CD+4 T細胞亞群及其細胞因子的影響。
　　方法：將60只4~5周SPF級BALB/c雌性小鼠隨機分為6組：空白對照組、模型對照組、地塞米松陽性對照組（1.25mg·kg-1）、芒果苷高劑量組（400mg·kg-1）、芒果苷中劑量組（200mg·kg-1）和芒果苷低劑量組（100mg

2、·kg-1），每組10只。采用OVA致敏和激發(fā)構建小鼠哮喘模型。
　　1芒果苷治療過敏性哮喘的藥效學研究：觀察激發(fā)時各組小鼠的哮喘發(fā)作表現；細胞涂片進行外周血中白細胞分類計數；HE染色觀察肺組織病理切片炎癥細胞浸潤情況，確認成功的復制哮喘動物模型。
　　2芒果苷治療過敏性哮喘的免疫機制研究：采用蛋白芯片技術檢測小鼠血清中相關炎癥細胞因子的蛋白表達水平；采用利用 FACS技術檢測哮喘小鼠T細胞中CD4+IFN-γ+細胞、 CD

3、4+IL-4+細胞、CD4+IL-17+細胞、CD4+Foxp3+細胞占CD4+T細胞的比例的變化，以進一步明確芒果苷對Th1、Th2、Thl7和Treg細胞分化的調節(jié)作用。
　　結果：1芒果苷治療過敏性哮喘的藥效學研究：與模型組比較，各芒果苷治療組小鼠哮喘發(fā)作表現如嗆咳、呼吸急促、躁動不安、腹肌收縮、紫紺等癥狀明顯減輕（P<0.05~0.01）；芒果苷各劑量組均能明顯減少外周血中嗜酸性粒細胞（EOS）、嗜中性粒細胞（NEU）比例

4、（P<0.01），芒果苷中、低劑量組能減少外周血中白細胞總數（P<0.01）；芒果苷各劑量組均可不同程度的改善肺組織的病理學改變，減輕氣道炎癥（P<0.05~0.01）。
　　2芒果苷治療過敏性哮喘的免疫分子機制研究
　　2.1芒果苷對哮喘小鼠血清中相關細胞因子蛋白水平影響：蛋白芯片結果顯示：與模型組相比，芒果苷各劑量組均可顯著提高小鼠血清中IFN-γ、IL-10的表達水平（P<0.05~0.01）；芒果苷高劑量組可明顯降低

5、IL-4、IL-17的表達水平（P<0.05~0.01）；芒果苷中劑量組可明顯降低 IL-17的表達水平（P<0.01），對 IL-4的表達有降低趨勢（P>0.05）；芒果苷低劑量組對IL-17有降低趨勢（P>0.05）。
　　2.2芒果苷對CD+4 T細胞亞群及細胞因子分化和功能的影響：流式細胞儀檢測結果顯示：與模型組相比，芒果苷高劑量組可顯著降低小鼠脾細胞中CD4+IL-4+、CD4+IL-l7+細胞占CD4+細胞的比例（P<

6、0.05）；芒果苷中劑量組對CD4+IL-4+、CD4+IL-l7+細胞占CD4+細胞的比例有降低的趨勢；芒果苷高、中劑量組對 CD4+IFN-γ+細胞/ CD4+細胞有增加的趨勢（P>0.05）；芒果苷低劑量組 CD4+IFN-γ+細胞/ CD4+細胞有所增加（P<0.05），對CD4+Foxp3+細胞/CD4+細胞有增加趨勢（P>0.05）。
　　結論：1芒果苷可明顯減輕激發(fā)時哮喘小鼠的發(fā)作表現，改善肺組織病理學改變，減輕氣道

7、炎癥，進一步證實了芒果苷具有平喘的藥效作用,并成功復制哮喘模型。
　　2芒果苷治療過敏性哮喘的免疫機制可能是：①調節(jié)Th1、Th2、Treg和Th17細胞的細胞因子的表達：即可上調Th1型細胞因子IFN-γ和Treg型細胞因子IL-10的表達，抑制Th2型細胞因子IL-4和Th17型細胞因子IL-17的表達；②調節(jié)Th1、Th2、Treg和Th17細胞的分化：即上調Th1型細胞占CD4+細胞比例和降低Th17型細胞、Th2型細胞占