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1、本研究采用PCR-RFLP和PCR-SSCP兩種技術(shù)手段,以郟縣紅牛成年母牛共計(jì)145個(gè)個(gè)體為研究對(duì)象,分析了DGAT2基因第3、第6內(nèi)含子和IGF2基因第2外顯子的遺傳變異,并以體尺性狀作為衡量牛生長(zhǎng)發(fā)育性狀的指標(biāo),運(yùn)用最小二乘線(xiàn)性模型,對(duì)所檢測(cè)到的多態(tài)位點(diǎn)與生長(zhǎng)發(fā)育性狀的關(guān)系進(jìn)行了分析,探討了DGAT2基因、IGF2基因作為影響牛生長(zhǎng)發(fā)育候選基因的可能性,所得結(jié)果如下: 1、利用PCR-SSCP方法分析了郟縣紅牛DGAT2基
2、因第3內(nèi)含子的多態(tài)性,并利用最小二乘擬合線(xiàn)性模型,對(duì)多態(tài)位點(diǎn)不同基因型與牛體重和體尺性狀進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。結(jié)果表明:DGAT2基因第3內(nèi)含子多態(tài)性豐富,群體中含有A、B、C、D、E、F、G七種基因型。頻率最高的是A基因型42.3%,其次是F型21.2%,B、G型8.9%,C、E型6.5%,D型5.7%。七種基因型間,體長(zhǎng)、體重均達(dá)到顯著(P<0.05),尻長(zhǎng)則達(dá)到極顯著(P<0.01)。十字部高、腰角寬、坐骨端寬不同基因型之間沒(méi)有顯著影響
3、。 2、本研究首次利用PCR-RFLP技術(shù)對(duì)隨機(jī)抽取的92頭郟縣紅牛的DGAT2基因第6內(nèi)含子進(jìn)行多態(tài)性分析。結(jié)果表明,DGAT2基因第6內(nèi)含子的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物被限制性酶TaqI酶切消化后表現(xiàn)多態(tài)性。經(jīng)電泳檢測(cè)后,顯出AA、AB兩種不同基因型。AA基因型顯示385 bp、596 bp兩個(gè)片段,AB基因型顯示981.bp、596 bp、385 bp三條帶。該基因座處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài),通過(guò)對(duì)郟縣紅牛DGAT2基
4、因多態(tài)性與樣本體重及體尺指標(biāo)的方差分析顯示:郟縣紅牛DGAT2基因不同基因型對(duì)郟縣紅牛體重和體長(zhǎng)有顯著影響(P<0.05),而對(duì)其他體尺指標(biāo)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著影響(P>0.05),且初步認(rèn)為AB基因型對(duì)選擇有正向效應(yīng)。 3、本研究利用PCR-SSCP技術(shù)首次對(duì)郟縣紅牛母牛IGF2基因第2外顯子多態(tài)性及其與生長(zhǎng)性狀關(guān)系進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:IGF2基因第2外顯子表現(xiàn)多態(tài)性,存在A(yíng)A、AB、BB三種不同基因型。其頻率分別為0.235/
5、0.480/0.285;A/B等位基因頻率分別為0.474/0.526該位點(diǎn)純合度為0.501,雜合度為0.499,位點(diǎn)間有效等位基因數(shù)為1.996。該基因位點(diǎn)處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05)。通過(guò)對(duì)郟縣紅牛IGF2基因第2外顯子位點(diǎn)不同基因型與樣本體重及其它體尺指標(biāo)的關(guān)聯(lián)分析表明:不同基因型對(duì)胸圍(P<0.01)和體重(P<0.05)有顯著影響,AB基因型個(gè)體的胸圍和體重明顯大于A(yíng)A和BB型個(gè)體。說(shuō)明IGF2基
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