胰島素抵抗大鼠肝臟組織p-IRE-1α的表達及意義.pdf

1、隨著生活水平的提高和生活方式的改變，2型糖尿病( type2 diabetes mellitus，T2DM)已成為世界上最普遍和嚴重的代謝性疾病之一。T2DM是以胰島素抵抗(insulin resistance，IR)和胰島β細胞功能障礙為主要特征的復(fù)雜的多因素疾病。IR是指胰島素作用的靶器官（主要是肝臟、脂肪和肌肉組織）對胰島素作用的敏感性或反應(yīng)性下降，正常劑量的胰島素只能產(chǎn)生低于正常的生理效應(yīng)，或需要超過正常劑量的胰島素才能達到正常

2、的生理效應(yīng)。IR的病因和發(fā)病機制尚未完全明確，目前關(guān)于IR的發(fā)病機制主要有炎癥學說、氧化應(yīng)激學說和炎癥-氧化應(yīng)激-炎癥學說等。近年來的研究資料顯示，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)作為營養(yǎng)過剩的早期結(jié)局，是IR發(fā)生發(fā)展的原因之一。本研究通過高脂飼料喂養(yǎng)并經(jīng)高血漿胰島素-正常血糖鉗夾技術(shù)評估，建立IR大鼠模型。在此基礎(chǔ)上通過Western印跡技術(shù)檢測大鼠肝臟組織ERS標志分子之一-磷酸化的肌醇

3、需求激酶-1α(phosphorylation of the inositol requiring enzyme-1α，p-IRE-1α)蛋白表達的變化，并探討p-IRE-1α蛋白表達變化的意義。
　　 目的:
　　 通過檢測高脂飼料喂養(yǎng)的IR大鼠血清游離脂肪酸（free fatty acids，F(xiàn)FAs）水平和肝臟組織p-IRE-1α蛋白表達水平的變化，并分析兩者的相關(guān)性，探討IR大鼠肝臟組織p-IRE-1α蛋白表達的

4、變化及意義。
　　 方法:
　　 SPF級4周齡雄性Wistar大鼠30只，隨機分為正常飲食組(NC組)和高脂飲食組（HF組），每組15只。NC組大鼠采用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，作為對照組；HF組大鼠采用高脂飼料喂養(yǎng)，建立IR大鼠模型。每周固定時間監(jiān)測兩組大鼠體質(zhì)量和尾靜脈血糖。喂養(yǎng)10周后，以高血漿胰島素-正常血糖鉗夾技術(shù)(hyperinsulinemia-euglycemia clamp technique，HECT)評估IR

5、大鼠模型的建立。應(yīng)用ELISA方法檢測NC組和HF組大鼠血清基礎(chǔ)胰島素水平；應(yīng)用Western印跡方法檢測兩組大鼠肝臟組織中p-IRE-1α蛋白的表達。
　　 結(jié)果:
　　 喂養(yǎng)10周后，HF組和NC組大鼠體質(zhì)量和基礎(chǔ)血糖水平差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。與NC組相比，HF組大鼠基礎(chǔ)血清胰島素水平明顯升高(P＜0.05)；HF組大鼠附睪脂肪重量指數(shù)明顯升高(P＜0.01)；HF組大鼠60～120min的平均葡萄糖輸