KISS-1基因在母豬初情期下丘腦-垂體-卵巢軸中的定位和發(fā)育性變化.pdf

1、本研究以初生、30、60、70日齡、90同齡的小梅山豬母豬和初生、60、120、150日齡、180同齡的蘇姜豬母豬為研究對(duì)象，目的是通過免疫組化技術(shù)和熒光定量PCR技術(shù)，把與初情期有關(guān)的基因KISS-1 mRNA在下丘腦、垂體和卵巢的分布定位及發(fā)育性表達(dá)變化聯(lián)系起來，探索這個(gè)基因在初情期啟動(dòng)機(jī)制中的作用，為闡明動(dòng)物生殖機(jī)理和早熟品種選種選育提供理論基礎(chǔ)。結(jié)果如下： 1.用免疫組化技術(shù)檢測(cè)KISS-1 mRNA在下丘腦、垂體和卵巢

2、的分布定位。在小梅山母豬和蘇姜母豬五個(gè)不同發(fā)育日齡的下丘腦、垂體和卵巢三種組織中，均檢測(cè)到KISS-l mRNA陽性顆粒，表明小梅山母豬和蘇姜母豬五個(gè)不同發(fā)育階段的三種組織中均有KISS-1 mRNA表達(dá)。其中下丘腦在初情期時(shí)陽性顆粒最多；各級(jí)卵泡中以初情期時(shí)成熟卵泡的陽性顆粒最多。 2.放射免疫測(cè)定(RIA)五個(gè)日齡血漿FSH、LH、E2、P4濃度變化規(guī)律。結(jié)果表明：小梅山母豬和蘇姜豬母血漿LH、FSH、E2濃度變化的趨勢(shì)大體

3、一致，均為初生時(shí)有較高的水平，隨后迅速下降，初情期前(小梅山母豬60日齡，蘇姜母豬120日齡)開始升高，至初情期時(shí)達(dá)到一個(gè)峰值。P4在初生時(shí)濃度較低，在達(dá)到高峰期之前，P4的濃度比較平穩(wěn)，變化不顯著(P>0.05)。 3.用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)小梅山母豬和蘇姜母豬五個(gè)不同發(fā)育日齡的下丘腦、垂體和卵巢三種組織中KISS-1 mRNA的表達(dá)豐度變化。結(jié)果顯示：下丘腦、垂體和卵巢三種組織中KISS-1 mRNA的表達(dá)量均在初情期最高

4、；小梅山豬KISS-1 mRNA表達(dá)量從初生到初情期表達(dá)量逐漸上升，初情期后呈下降趨勢(shì)：蘇姜豬KISS-1 mRNA表達(dá)量的變化趨勢(shì)同小梅山豬，從初生到初情期表達(dá)量逐漸上升，初情期后呈下降趨勢(shì)，但是蘇姜母豬卵巢五個(gè)不同發(fā)育階段KISS-1 mRNA表達(dá)量變化比小梅山母豬卵巢KISS-l mRNA表達(dá)量的變化幅度小，但各器官間存在差異。小梅山母豬下丘腦與卵巢Kiss-1 mRNA表達(dá)量差異不顯著(P>0.05)，但兩者與垂體均存在顯著差異

5、(P<0.05)。而蘇姜豬不同發(fā)育階段期間在下丘腦分別與垂體、卵巢KISS-1 mRNA的表達(dá)量差異不顯著(P>0.05)；而垂體與卵巢的表達(dá)豐度差異顯著(P<0.05)。 總之，本研究探討了KISS-1基因與母豬初情期啟動(dòng)的關(guān)系，測(cè)定了KISS-1mRNA在小梅山母豬和蘇姜母豬下丘腦．垂體．卵巢中的定位和初情期前后的表達(dá)規(guī)律以及不同發(fā)育階段激素水平的變化，結(jié)果顯示：不同發(fā)育階段KISS-1 mRNA在HPG中的雜交信號(hào)、表達(dá)豐