酸漿和小酸漿的組織培養(yǎng)研究.pdf

1、酸漿屬植物酸漿和小酸漿具有重要的藥用價(jià)值，特別是酸漿不僅具有藥用價(jià)值，而且具有重要的食用和觀賞價(jià)值，擁有廣闊的開發(fā)利用前景。本研究以河南省寶天曼國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)的野生酸漿和小酸漿為實(shí)驗(yàn)材料，研究了不同的外植體類型、不同的激素類型及濃度配比對(duì)植物細(xì)胞脫分化和再分化的影響，探討了組織培養(yǎng)過程中防止污染及褐化的技術(shù)措施，初步建立了酸漿和小酸漿的組織培養(yǎng)體系。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： (1)酸漿葉片用0.1％的升汞消毒7min效果最好，

2、存活率可高達(dá)90.8％；葉柄和莖段對(duì)消毒劑較敏感，消毒時(shí)間要適當(dāng)?shù)目s短，最佳的升汞消毒時(shí)間都是5 min；子葉、胚軸由于接觸外界的時(shí)間較短，3 min即可達(dá)理想的消毒效果。 (2)酸漿雖然為多年生草本植物，但其莖木質(zhì)化較為嚴(yán)重，在初代培養(yǎng)中外植體褐化嚴(yán)重，不利于組織培養(yǎng)體系的建立。培養(yǎng)基中加入0.5 g/L的PVP，可以在一定程度上抑制外植體褐化。 (3)酸漿誘導(dǎo)不定芽最佳的外植體類型為葉柄，最佳的生長(zhǎng)素類型為IAA，最

3、佳的激素濃度組合為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA，不定芽分化率可達(dá)62.5％。 (4)繼代培養(yǎng)中不定芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IAA，不定芽增殖倍數(shù)可達(dá)5.0。 (5)在酸漿試管內(nèi)生根實(shí)驗(yàn)中，生長(zhǎng)素IAA和培養(yǎng)基中低的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度都有利于根的形成，但以低的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度更有利于根的生成，生根率可達(dá)91.7％。 (6)在小酸漿葉片、葉柄、莖段

4、、膨大花萼四種外植體類型中，可以產(chǎn)生兩種類型的愈傷組織，一種為膨大腫脹型，以膨大花萼易于形成此類愈傷組織，一種為疏松脆型，以培養(yǎng)初期的莖段、葉柄及葉片的切口處易于形成此類愈傷組織。兩種類型的愈傷組織中，以疏松脆型的愈傷組織生長(zhǎng)較快，不定芽分化率較高。四種外植體中以莖段的愈傷組織誘導(dǎo)率最高，可達(dá)100％，且形成時(shí)間較早。在莖段細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的同時(shí)，有時(shí)伴隨有不定芽直接由莖段外植體產(chǎn)生?？傊?，莖段為小酸漿組織培養(yǎng)較為適合的外植體類型

5、。 (7)生長(zhǎng)素為小酸漿愈傷組織誘導(dǎo)必需的植物激素，但其濃度變化對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)率沒有顯著影響。愈傷組織誘導(dǎo)不定芽最佳的激素配比為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA或MS+3.0 mg/L 6-BA，誘導(dǎo)率都可達(dá)100％。 (8)小酸漿試管苗增殖適合的6-BA濃度范圍為0.05-0.5 mg/L，最高增殖率可達(dá)4.28，過高的細(xì)胞分裂素濃度抑制試管苗增殖。 (9)低濃度的細(xì)胞分裂素有利于小