扶素康的固相合成及純化.pdf

1、本文首先研究了36肽扶素康的Fmoc法固相化學(xué)合成.系統(tǒng)地研究了扶素康的Fmoc固相逐步化學(xué)合成和Fmoc固相片斷縮合化學(xué)合成.Fmoc固相逐步化學(xué)合成的工藝條件為:以DMF為反應(yīng)溶劑；HBTU/HOBt/DIEA為縮合劑；王樹(shù)脂為固相載體；TFA/p-甲基苯酚/EDT/水(97/0.25/0.25/2.5,V/V)為切割條件,保護(hù)氨基酸2倍過(guò)量進(jìn)行縮合反應(yīng).固相片斷縮合化學(xué)合成扶素康中,建立了合成全保護(hù)多肽片段的合成方法:以.2-氯三

2、苯甲基樹(shù)脂和王樹(shù)脂為固相載體； HBTU/HOBt/DIEA為縮合劑；DMF為反應(yīng)溶劑,HOAc/TFE/DCM(1:2:7,體積比)為切割條件.在片段縮合中,系統(tǒng)研究了多肽片斷的分段策略、片斷縮合溶劑、片斷縮合劑對(duì)片斷縮合法合成扶素康質(zhì)量的影響,確立了優(yōu)化的片段縮合工藝條件為:將扶素康按殘基1～10,11～20,21～25,26～36分作4段；以王樹(shù)脂為固相載體；HATU/HOAt/DIEA為縮合劑(4倍過(guò)量)；DMF/DCM

3、(1:1)為反應(yīng)溶劑；每步加入的全保護(hù)肽段為1.5倍過(guò)量；縮合及脫保護(hù)完成后以DCM為洗滌溶劑洗滌5次,進(jìn)行固相片段縮合反應(yīng).該條件下合成的扶素康,粗品收率達(dá)67.31﹪,按標(biāo)準(zhǔn)曲線定量分析其純度達(dá)38.75﹪. 通過(guò)對(duì)扶素康粗品的分離純化研究,確立了純化工藝路線為:先用離子交換層析進(jìn)行初步純化,再以反相高效液相制備層析進(jìn)行最終純化.經(jīng)離子交換層析后產(chǎn)品的純度提高到78﹪,收率為55﹪；最終純化結(jié)果純度達(dá)95﹪.兩步純化的總收率