益氣化瘀清熱方治療激素敏感型腎病綜合征的臨床觀察及其對(duì)足細(xì)胞相關(guān)蛋白podocin的表達(dá)影響.pdf

1、1（臨床部分）
　　目的:通過臨床觀察益氣化瘀清熱方治療小兒激素敏感型腎病綜合征的療效，為臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:收集河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院和鄭州市兒童醫(yī)院的激素敏感型腎病綜合征患兒的病例，觀察其在治療前及治療后2周、4周、8周、12周、24周及36周的24h-UTP、ALB、TG、CHOL、IgG、FIB、PT、激素相關(guān)副作用及血常規(guī)、肝腎功相關(guān)安全指標(biāo)，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析了解兩組的差異。
　　結(jié)果:①療程2

2、周治療組臨床療效優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05)；②治療組復(fù)發(fā)率為9.4％，對(duì)照組復(fù)發(fā)率為32.4%，前者明顯低于后者(P<0.05)；③療程2周起治療組在降低24-UTP及升高ALB、IgG方面優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)；④療程4周時(shí)治療組在降低 CHOL及延長 PT方面明顯優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)；⑤治療前后在 TG和FIB方面各觀察時(shí)間點(diǎn)兩組間比較無差異(P>0.05)；⑥治療組在降低感染頻次、減少汗出及急躁積分方面優(yōu)于對(duì)照組（P<0

3、.05），但對(duì)滿月臉及水牛背無明顯作用（P>0.05）。
　　結(jié)論:①益氣化瘀清熱方具有降低尿蛋白和升高血漿白蛋白、IgG的作用，且在2周內(nèi)起效；②益氣化瘀清熱方具有降低膽固醇、FIB和延長 PT的作用，且在4周內(nèi)起效；③益氣化瘀清熱方具有提高機(jī)體免疫功能、降低復(fù)發(fā)率、感染頻次及減輕激素引起的汗出和急躁程度的作用，但其對(duì)激素引起的水牛背及滿月臉無作用。
　　2（實(shí)驗(yàn)部分)
　　目的：通過嘌呤霉素氨基核苷（PAN）刺激誘

4、導(dǎo)體外培養(yǎng)小鼠足細(xì)胞損傷模型，觀察益氣化瘀清熱方及其拆方對(duì)小鼠足細(xì)胞表達(dá) podocin的影響，探討益氣化瘀清熱方對(duì)足細(xì)胞損傷的作用機(jī)理。
　　方法：體外培養(yǎng)足細(xì)胞，通過實(shí)時(shí)熒光定量 PCR檢測不同天數(shù)和不同濃度 PAN刺激足細(xì)胞 podocin mRNA的表達(dá)情況確立模型建立的最佳時(shí)間及 PA N的濃度；并利用 PA N誘導(dǎo)足細(xì)胞損傷模型隨機(jī)分為益氣組、化瘀組、清熱組、復(fù)方組、雷公藤組、對(duì)照組、模型組及控制組，分別予各類含藥血清

5、進(jìn)行培養(yǎng)24h及48h后，采用實(shí)施熒光定量 PCR及 Wersten Blot技術(shù)檢測各組對(duì)足細(xì)胞 podocin mRNA及其蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：①足細(xì)胞 podocin mRNA的表達(dá)量在第7、8天高于4、5、6、9天（P<0.05），第7天與第8天無明顯差別（P>0.05）。②不同濃度 PAN損傷足細(xì)胞除刺激24h時(shí)50ug/ml與75ug/ml濃度的podoicn mRNA無差異（P>0.05）外，其余提示 podoc

6、in mRNA的表達(dá)量隨濃度的增加而降低（P<0.05）。③各組干預(yù)24h后復(fù)方組、雷公藤組 podocin mRNA的表達(dá)量高于對(duì)照組（P<0.05），但雷公藤組與復(fù)方組無明顯差異（P>0.05）；益氣組、化瘀組、清熱組與對(duì)照組比較無差異（P>0.05）。④各組干預(yù)48h時(shí)化瘀組、清熱組、復(fù)方組和雷公藤組 podoicn mRNA表達(dá)量高于對(duì)照組（P<0.05），其中復(fù)方組和雷公藤組作用無差異（P>0.05）,但兩組作用優(yōu)于清熱組及化

7、瘀組（P<0.05），而清熱組與化瘀組之間無差異（P>0.05）；益氣組與對(duì)照組比較無差異（P>0.05）。⑤各組干預(yù)24h時(shí)益氣組、清熱組和復(fù)方組 podocin蛋白表達(dá)量均高于對(duì)照組(P<0.05)，其中復(fù)方組作用強(qiáng)于清熱組和益氣組（P<0.05），而益氣組與清熱組無差異(P>0.05)；化瘀組與對(duì)照組無差異(P>0.05)。⑥各組干預(yù)48h復(fù)方組、化瘀組 podocin蛋白的表達(dá)量高于對(duì)照組（P<0.05），但復(fù)方組與化瘀組作用相

8、當(dāng)（P>0.05）；益氣組、清熱組與對(duì)照組無差異(P>0.05)。
　　結(jié)論：①本實(shí)驗(yàn)的模型條件設(shè)立在50ug/ml的PAN刺激，于第7天提取細(xì)胞總 RNA；②對(duì)于 PAN刺激24h后復(fù)方組對(duì) podocin mRNA及蛋白表達(dá)降低有一定的上調(diào)作用；益氣組與清熱組對(duì) podocin蛋白的表達(dá)上調(diào)有一定的作用，但對(duì) podocin mRNA表達(dá)上調(diào)無效；化瘀組對(duì) podocin mRNA及其蛋白表達(dá)上調(diào)均無作用；③對(duì)于 PAN刺激4