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文檔簡(jiǎn)介
1、BAG家族蛋白(Bcl-2-associated anthanogene family proteins)最初是從哺乳動(dòng)物鑒定到,因能夠與抗凋亡蛋白Bcl2結(jié)合并促進(jìn)細(xì)胞生存而得名(Takayama et al.1995)。擬南芥基因組含有8個(gè)BAG蛋白,它們編碼的蛋白分子都含有BAG結(jié)構(gòu)域(BAG domain)。根據(jù)這些蛋白所含其它保守序列的情況可將擬南芥BAG蛋白家族分為三類:(1)人類BAG1在植物中的直向同源物:AtBAG1,
2、AtBAG2,AtBAG3和AtBAG4,它們都帶有泛素類的結(jié)構(gòu)域;(2)除BAG結(jié)構(gòu)域外,無(wú)其它保守序列:AtBAG5;(3)含有鈣調(diào)素結(jié)合結(jié)構(gòu)域,可能受Ca2+的調(diào)控:AtBAG6;AtBAG7和AtBAG8。但這些BAG蛋白在擬南芥體內(nèi)的功能尚不清楚。 為了探索擬南芥BAG蛋白的功能,我們從TAIR(The Arabidopsis Information Resources)突變體庫(kù)鑒定了兩種BAG蛋白基因(AtBAG4和
3、AtBAG7)的純合突變體,并分析了它們的表型變化。發(fā)現(xiàn)這些突變體在正常的生長(zhǎng)條件下與野生型(Columbia型)沒(méi)有明顯的表型區(qū)別,都能夠正常生長(zhǎng)發(fā)育、開花和結(jié)實(shí)。之后進(jìn)一步分析了鹽脅迫、氧化脅迫、高溫脅迫、UVB輻射等逆境脅迫對(duì)這些突變體的影響。結(jié)果顯示突變體對(duì)鹽脅迫比野生型敏感,在50 mM的NaCl處理?xiàng)l件下突變體停止生長(zhǎng),逐漸枯萎死亡,但野生型在此條件下卻能夠生存。說(shuō)明BAG蛋白可能在擬南芥的抗鹽脅迫方面起著重要作用。
4、 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所試的氧化脅迫條件下,同樣濃度H2O2處理下的突變體比野生型的葉綠素含量低,表明該基因缺失的突變體增加了對(duì)H2O2反應(yīng)的敏感性。高溫脅迫和UVB輻射條件下初步斷定野生型和突變體擬南芥并無(wú)明顯差別。 為了進(jìn)一步證實(shí)BAG蛋白在擬南芥抗鹽脅迫方面的作用,我們構(gòu)建了超量表達(dá)AtBAG4、AtBAG7與綠色熒光蛋白(GFP)融合蛋白的植物表達(dá)載體pBI12-GFP-AtBAG7和pBI12-GFP-AtBAG4,轉(zhuǎn)化擬南芥,
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