AGX0104抑制脂肪生成機(jī)理的研究.pdf

1、在該試驗(yàn)中,著重探討了脂肪和胰島素抵抗形成的基礎(chǔ)原理.該課題中運(yùn)用了PPARγ的拮抗體(AGX0104)來(lái)阻止PPARγ的活性,以此來(lái)分析PPARγ在脂肪形成和胰島素抵抗形成的作用.發(fā)現(xiàn):沒(méi)有PPARγ的活性,就沒(méi)有C/EBPα的表達(dá)和脂肪顆粒的形成.提示:C/EBPα的表達(dá)依賴(lài)于PPARγ的表達(dá),PPARγ和C/EBPα是影響脂肪形成和胰島素抵抗的重要因素.為了探討C/EBP家族中的另一重要成員C/EBPβ在脂肪形成和胰島素抵抗中的地

2、位,利用鼠脂肪前細(xì)胞外源性表達(dá)C/EBPβ,發(fā)現(xiàn)常規(guī)誘導(dǎo)后,這種細(xì)胞可以有PPARγ的表達(dá),并有脂肪顆粒的形成,但無(wú)C/EBPα的表達(dá)和胰島素的敏感性.加入PPARγ的受體后,C/EBPα開(kāi)始表達(dá),并表現(xiàn)有胰島素的敏感性.提示:胰島素的敏感性和C/EBPα的表達(dá)息息相關(guān).任何可以影響C/EBPβ,C/EBPα,PPARγ的因子都可作為影響肥胖和胰島素抵抗的因素.AGX0104可以完全阻斷PPARγ的合成,繼而有效的阻斷脂肪細(xì)胞的形成.A

3、GX0104具有毒性低,特異性高的特點(diǎn),為預(yù)防肥胖和子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生提供了理論依據(jù).如果能開(kāi)發(fā)應(yīng)用于臨床,可為臨床防治子宮內(nèi)膜癌提供一個(gè)嶄新的前景.材料與方法:1.轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的制備.2.質(zhì)粒擴(kuò)增.3.質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,制備穩(wěn)定表達(dá)C/EBP β的細(xì)胞系.4.脂肪前細(xì)胞向脂肪細(xì)胞分化的過(guò)程中,應(yīng)用蛋白質(zhì)聚丙烯胺凝膠電泳檢測(cè)PPARγ,C/EBP β,C/EBPα,Adiponectin,Perilipin的表達(dá).結(jié)論:1.AGX0104可以阻斷PP

4、AR γ,Adiponectin,Perilipin,C/EBP α的表達(dá),進(jìn)而阻斷3T3-L1脂肪前細(xì)胞向脂肪細(xì)胞的轉(zhuǎn)化過(guò)程.2.C/EBP β可以引起PPARγ的表達(dá),但不足以引起C/EBPα的表達(dá),需要PPARγ受體的參與.3.PPARγ是引起C/EBPα表達(dá)的重要因素,沒(méi)有PPARγ的表達(dá),就沒(méi)有C/EBPα的表達(dá).4.C/EBPα的表達(dá)的產(chǎn)生有利于胰島素敏感性的產(chǎn)生.任何可以影響C/EBP δ,C/EBPα和PPARγ表達(dá)的因