重慶市及其周邊地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征分子流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由PRRSV(porcine reproductive and respiratory syndrome virus)引起的以懷孕母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)和死胎等繁殖障礙及仔豬呼吸道癥狀等為主要征候群的高度接觸傳染性疾病。2006年我國爆發(fā)了“無名高熱”病，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，經(jīng)證實(shí)該病的病原主要為美洲型PRRSV

2、的Nsp2基因部分缺失所產(chǎn)生的變異株(HP-PRRSV,highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus)。2007年P(guān)RRS在重慶市及其周邊地區(qū)頻繁發(fā)生，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失。為了了解本地區(qū)PRRSV的流行規(guī)律以及病毒的遺傳變異情況，我們對2007年6.12月采自重慶市及其周邊7個地區(qū)9個豬場的疑似PRRS感染的病料進(jìn)行了病原檢測，為PRRS的監(jiān)

3、控提供有力的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。 本研究利用RT-PCR方法對187份疑似PRRS病料進(jìn)行病原檢測，結(jié)果52份為陽性。根據(jù)強(qiáng)毒滅活苗株JXA1株(GeneBank no.EF112445)較經(jīng)典株CH-1a株(GeneBank no.AY023626)在Nsp2處不連續(xù)缺失30個氨基酸這一特點(diǎn)，利用Primer Premier5.0在缺失區(qū)兩端的保守序列設(shè)計(jì)引物P3/P4，對HP-PRRSV進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示29份為陽性。HP-PRRSV

4、陽性樣品BQ2、LK、LC、DA3、LK2和DZ的RT-PCR產(chǎn)物經(jīng)回收后插入PUCm-T載體，轉(zhuǎn)入DH5a擴(kuò)大培養(yǎng)送往上海生物工程公司進(jìn)行序列測定。所有測回序列與JXA1株同源性為98.4％-99.1％。樣品核苷酸序列推導(dǎo)出的氨基酸序列通過生物學(xué)軟件DNAStar中的Protean得到的二級結(jié)構(gòu)并與JXA1、BJsy06、NX06和Henan-1利用同樣方法得到的二級結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較，結(jié)果表明，利用Alpha regions，Chou-F

5、asman方法，Beta regiOnS，Chou—Fasman方法，F(xiàn)lexible Regions-Karplus—SchuLz方法，Hydrophilicity Plot-Kyte-Doolittle方法，Antigentic Index-Jameson-Wolf方法和Surface Probability Plot-Emini方法比較得出的這些序列的二級結(jié)構(gòu)基本一致。 本次調(diào)查結(jié)果表明，重慶市及其周邊7個地區(qū)PRRSV的

6、感染普遍存在，PRRSV總的陽性率為27.81％(52/187)。其中，HP-PRRSV陽性率為15.51％(29/()，占PRRSV陽性總數(shù)的55.77％(29/52)；經(jīng)典PRRSV陽性率為12.3％(23/187)，占PRRSV陽性總數(shù)的44.23％(23/52)。在整個調(diào)查期間，重慶地區(qū)豬群HP-PRRSV和經(jīng)典型PRRSV流行呈現(xiàn)出一定的交替變化趨勢：HP-PRRSV在2007年6-8月份23份PRRSV陽性樣品中的陽性率高達(dá)