2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:人類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)因為在母體胎兒之間的免疫耐受中發(fā)揮了關(guān)鍵性作用而被注意,提示它可能應(yīng)用于器官移植。HLA-G在體外誘導(dǎo)表達(dá)已被證實有誘導(dǎo)免疫耐受的特性,移植術(shù)后患者體內(nèi)HLA-G的表達(dá)已被證實與移植術(shù)后急性和慢性排斥反應(yīng)發(fā)生率降低有關(guān)。我們使用轉(zhuǎn)染攜帶人HLA-G基因的慢病毒轉(zhuǎn)染大鼠原代培養(yǎng)肝細(xì)胞及大鼠移植肝臟,在體外及在體條件下探討HLA-G的表達(dá)是否有直接保護(hù)移植肝臟免受排斥反應(yīng)損傷的效果。
  方法:

2、r>  1、取260只健康雄性SD大鼠,分三個階段進(jìn)行,先建立大鼠原位肝移植模型的手術(shù)訓(xùn)練和探索。手術(shù)熟練后,取40只SD大鼠和40只Wistar大鼠,建立SD至Wistar大鼠肝移植急性移植排斥反應(yīng)模型。
  2、建立攜帶HLA-G的慢病毒表達(dá)體系。
  3、進(jìn)行SD大鼠肝細(xì)胞原代培養(yǎng)。
  4、將攜帶人HLA-G的慢病毒轉(zhuǎn)染SD大鼠原代培養(yǎng)肝細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后7天,通過免疫熒光、RT-PCR和Western Blot實驗

3、進(jìn)行檢測,分別從病毒轉(zhuǎn)染、mRNA水平和蛋白水平全面評價HLA-G慢病毒轉(zhuǎn)染的效果。
  5、采用kamada二套管法建立SD和Wistar大鼠的原位肝移植模型45例,隨機(jī)分為三組,每組15例。實驗組在SD大鼠的供體肝臟取下后,從門靜脈輸注2ml包含有107TU/ml攜帶HLA-G基因的慢病毒,將攜帶人HLA-G的慢病毒轉(zhuǎn)染大鼠供肝,與不加任何處理的對照組和術(shù)后規(guī)律使用FK506的對照組進(jìn)行對比,對比術(shù)后三組肝組織中的HLA-G的

4、表達(dá)水平、術(shù)后第7天、第14天和第56天的AST和BIL值以及病理切片、術(shù)后生存天數(shù)。探討攜帶HLA-G基因的慢病毒轉(zhuǎn)染供肝,是否可對抗大鼠急性肝移植排斥反應(yīng)。
  結(jié)果:
  1、經(jīng)訓(xùn)練,成功建立SD至Wistar大鼠肝移植急性移植排斥反應(yīng)模型。
  2、攜帶人HLA-G的慢病毒可成功轉(zhuǎn)染SD大鼠原代培養(yǎng)肝細(xì)胞。
  3、轉(zhuǎn)染攜帶有HLA-G慢病毒的實驗組術(shù)后7天大鼠的AST和BIL值,與術(shù)后使用FK506的對

5、照組差別有顯著性(P<0.05),與術(shù)后不加處理的對照組差別有極顯著性(P<0.01)。轉(zhuǎn)染攜帶有HLA-G慢病毒的實驗組術(shù)后12天、56天大鼠的AST和BIL值,與術(shù)后使用FK506的對照組差別有顯著性(P<0.01);轉(zhuǎn)染攜帶有HLA-G的實驗組的AST和BIL值,與術(shù)后不加處理的對照組差別有極顯著性(P<0.01)。對照組中位生存時間12.00天,F(xiàn)K506組中位生存時間70.50天, HLA-G組中位生存時間91.50天,各組之

6、間差別有顯著性(P<0.01)。提示這種治療可延長受體大鼠的存活期。病理切片結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染攜帶有HLA-G慢病毒的實驗組和術(shù)后使用FK506的陽性對照組,術(shù)后7天病理切片僅有輕度排斥反應(yīng),而術(shù)后不加任何處理的陰性對照組則顯示為重度排斥反應(yīng)。術(shù)后56天,F(xiàn)K506組病理切片顯示存在輕度排斥反應(yīng),而HLA-G組無排斥反應(yīng)。
  結(jié)論:
  1、轉(zhuǎn)染攜帶有HLA-G慢病毒作為治療性的手段用于大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)模型,能有效保護(hù)大

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