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1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文趨化因子與共刺激分子聯(lián)合基因治療肝癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名:覃林花申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):生物化學(xué)和分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:郭亞軍時(shí)玉舫2001.5.1AbstractAbstractAnimportantaspectofimmunityistherecruitmentandaccumulationoflymphocytesintotargettissuesAllchemokinefamilymembersarechemot
2、acticforselectedpopulationsofieukocytesAnotherimportantaspectofimmunityistoinduceproliferationandcytokineproductioninTcells,andcostimulatorymoleculesarethoughttoplayanimportantroleinprimingTcellsGeneticmodificationofmany
3、typesoftumorcellstoexpresseithercostimulatorymolecules,suchasB71,4一lBBL,orchemokines,suchasMIP—let,increasestheirimmunogenicityToaugmentantitumoreffectinvivo,thecombinationtreatmentofhepatocellularcarcinomacellswithcosti
4、mulatorymoleculegenesandchemokinegenesmediatedbyretroviruswasinvestigatedInthisworkwetransfectedhepal6celllinewithmMIPltx,m4—1BBLormB7—1generespectively,moreoverwealsotransfectthetumorcellswithbothmMIPletandm41BBLgenesTh
5、eexpressionofmMIPletwasconfirmedbyRT—PCRandimmunohistochemistry;whiletheexpressionofm4一lBBLormB7—1wasconfirmedbyflowcytometryWhenm41BBLormB71transfectedcellswereusedasstimulatorsofallogeneicspleenlymphocytesinmixedlympho
6、cyte—tumorculture(MLTC),T—cellproliferationweresignificantlyincreasedChemotaxisassayshowedthatmMIP一1dmodifiedcellscallsecretedsubstantiallevelsofchemokineactivityforactivatedmousespleenlymphocytesNoneofthetransfectants,i
7、ncludingthemulti—genetranfectantshowedalteredgrowrateinvitroTheinjectionofmMIP1stransfectedtumorcellssubcutaneously(sc)retardedtumourgrowth,whiletheinjectionofm41BBLormB71transfectantsprolongedtheanimaltumorbearinglifesp
8、anAlltumorfreeanimalsdevelopedlong—termimmunityagainstwild—typeHepal6butnotagainstEL4MiceinoculatedwiththemixtureofwtHepaI6andthechemokine/costimulatorymoleculeproducinghepal一6didn’tdeveloptumorInflammatorycellsinfiltrat
9、ionwerefoundintheinoculationsite_sofhepal一6transfectants,whilebothCD8andCD4cellsweredetectedTheseresultssuggestthatthecombinationofcostimulatorygeneandchemokinegenetherapycanaugmentantitumoreffectinvivoKeywords:chemokine
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