CD40L誘導(dǎo)成人急性淋巴細(xì)胞白血病源性樹突細(xì)胞及其功能研究.pdf

1、目的:腫瘤特異性抗原(TSA)缺失或低表達(dá)是腫瘤細(xì)胞逃逸免疫監(jiān)控的主要原因。樹突狀細(xì)胞(DC)是已知人體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞(APC)，如何以及哪種抗原對(duì)DC進(jìn)行負(fù)載從而有效激活特異性的CTL效應(yīng)一直是影響DC臨床應(yīng)用的核心問(wèn)題，通過(guò)合理的細(xì)胞因子誘導(dǎo)成人急性淋巴細(xì)胞性白血病(aALL)細(xì)胞自身分化為DC是一種全新的解決思路。CD40L可促進(jìn)B細(xì)胞的增殖、分化和存活。本實(shí)驗(yàn)旨在探討CD40L單因子誘導(dǎo)aALL細(xì)胞成為DC的可行性以及

2、觀察這種白血病來(lái)源的DC體外活化T細(xì)胞的能力。 方法:分離aALL初治患者骨髓液中單個(gè)核細(xì)胞(BMMNC)。采用CD40L (0.5μg/ml、1.5μg/ml、3μg/ml)單因子，加入接種有BMMNC的RPMll640完全培養(yǎng)基中，6天后流式細(xì)胞儀檢測(cè)DC免疫表型，培養(yǎng)后的細(xì)胞進(jìn)行染色體檢查，體外激發(fā)異基因及自體T細(xì)胞增殖試驗(yàn)。 結(jié)果:4例aALL初治患者中3例BMMNC經(jīng)CD40L培養(yǎng)至第72h即開始有零散集簇及小

3、集落形成，細(xì)胞體積變大；至第6天，進(jìn)一步變形，胞漿豐富，具有樹突狀突起的細(xì)胞增多、突起明顯。光鏡下觀察到具有典型的DC形態(tài)特征。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示細(xì)胞CDla、CD83、CD80、CD86表達(dá)明顯上調(diào)，培養(yǎng)上清液可檢測(cè)到IL-12、CCR7的分泌，染色體檢查證實(shí)其仍具有白血病源的遺傳學(xué)特征。MTT法檢測(cè)表明該DC具有強(qiáng)大的刺激異基因T細(xì)胞增殖的能力，加入外源性IL-12后可激發(fā)自體T細(xì)胞增殖。 結(jié)論:單用CD40L可成功誘導(dǎo)aA