乙型肝炎病毒攜帶者特異性細胞免疫功能與細胞因子表達的研究.pdf

1、目前，全球被乙型肝炎病毒慢性感染的人數(shù)超過了3.5億，35﹪-40﹪的慢性乙型肝炎終將轉化為肝硬化或肝癌，每年由乙肝病毒引起的死亡人數(shù)超過一百萬。中國是乙型病毒性肝炎的高發(fā)區(qū)，保守估計的乙肝慢性感染人數(shù)占全國人口的9﹪以上。HBV急性感染時，機體會發(fā)生強烈的細胞和體液免疫應答，其中最主要的是由CD8<'+>T和Th1細胞介導的細胞免疫反應，它們可直接殺傷被病毒感染的細胞或通過分泌IFN-γ等細胞因子抑制病毒復制；但是在慢性感染者體內，出

2、現(xiàn)了細胞免疫反應低下或免疫耐受，所以機體不能清除病毒。 第一章乙型肝炎病毒攜帶者細胞免疫功能和細胞因子的產生了解乙肝病毒誘導機體免疫耐受或免疫功能低下的機制是對乙肝進行有效防治的關鍵。 目的：探討HBV病毒攜帶者細胞免疫功能的狀況，以及這種細胞免疫功能狀況與體內乙肝病毒相關抗原、IFN-γ、IL-12等細胞因子水平間的關系，從而探討乙型肝炎病毒感染慢性化的可能機制。 方法；我們用乙肝病毒特異性抗原、非特異性多克隆

3、刺激物及相應的中和抗體等單獨或聯(lián)合作用于不同實驗組PBMCs、單核細胞等，用夾心ELISA法檢測其細胞培養(yǎng)上清中各種細胞因子水平，統(tǒng)計分析細胞因子之間以及乙肝抗原與細胞因子之間的關系。 結果：HBV病毒攜帶者PBMCs分泌的Th1型細胞因子，如IL-12P70、IL-12P40等，比健康對照組低；而抑制性細胞因子，如TGF-β等在HBV病毒攜帶者PBMCs細胞培養(yǎng)上清中升高；同時中和TGF-β和Th2型細胞因子IL-10能提高H

4、BV病毒攜帶者PBMC的Th1型細胞因子的分泌水平；從PBMC中分離出的單核細胞，它們分泌的IL-12P70、IL-12P40、TNF-α等，在HBV病毒攜帶者及健康對照組間沒有顯著性差異。 結論：從我們的結果看來，HBV攜帶者PBMC分泌的IL-12比健康對照組少；Th1/Th2偏移可能參與了病理機制；而HBV攜帶者PBMC中的單核細胞功能沒有受到損傷。據(jù)此，我們在醫(yī)療衛(wèi)生實踐中對慢性肝炎進行防治時可以考慮糾正這種Th1/Th

5、2平衡的偏移而對HBV感染者進行干預，以期能打破耐受，促進機體細胞免疫功能而抑制或清除病毒。 第二章外源性IL-12對乙肝病毒攜帶者細胞免疫功能的影響由于HBV病毒的直接或間接影響，Th1/Th2型細胞因子平衡的偏移，體內IFN-γ、IL-12的合成分泌能力受到部分抑制。 目的：探討外源性IL-12在體外對乙肝病毒攜帶者細胞免疫功能的影響及其機制，從而試圖通過糾正這種Th1/Th2平衡的偏移而對HBV感染者進行干預，為治

6、療。HBV患者提供新的思路。 方法：我們用夾心ELISA法檢測外源性IL-12和乙肝特異性抗原作用于乙肝病毒攜帶者PBMCs后細胞培養(yǎng)上清中的IFN-γ水平；用ELISPOT檢測能被外源性IL-12協(xié)同促進分泌：IFN-γ的抗原特異性T細胞在PBMCs中的頻率；用FCS檢測能被外源性IL-12和乙肝特異性抗原激活的細胞的表型。 結果：較低濃度的外源性IL-12能明顯促進乙肝特異性抗原從乙肝病毒攜帶者PBMCs中誘導分泌的