慢性乙型肝炎患者特異性T淋巴細(xì)胞的功能及抗病毒治療對(duì)其影響.pdf

1、目的： 探討慢性乙型肝炎病毒(CHB)患者外周血HLA—A2限制性HBcAg特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)的功能及抗病毒治療對(duì)其影響。 方法： 研究對(duì)象共216人，分顯性感染組、隱性感染組、攜帶組和對(duì)照組四組。其中顯性感染組73例為臨床診斷慢乙肝患者；隱性感染組60例為無(wú)肝病史、無(wú)乙肝疫苗接種史，肝功能生化檢測(cè)始終正常，HBV DNA陰性，血清學(xué)抗HBs陽(yáng)性，及抗HBc和/或抗HBe陽(yáng)性者；攜帶組53例為無(wú)癥

2、狀HBV DNA陽(yáng)性者；對(duì)照組30例為健康獻(xiàn)血員。所有研究對(duì)象采集靜脈血，分離單個(gè)核細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)直接免疫熒光法檢測(cè)各組HLA—A2基因分布頻率；以HBcAg18-27V和HBcAg18-27I兩條多肽分別刺激各組HLA—A2陽(yáng)性者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，用ELISPOT酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法檢測(cè)刺激PBMC后分泌IFN—γ的陽(yáng)性斑點(diǎn)數(shù)；顯性感染組HLA—A2陽(yáng)性者接受52周的核苷(酸)類(lèi)藥物抗病毒治療，于治療前、后分別檢測(cè)血清乙肝

3、病毒感染標(biāo)記物和血清ALT、HBV—DNA，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果將接受治療者分為不完全應(yīng)答組和完全應(yīng)答組；ELISPOT法檢測(cè)兩組PBMC對(duì)HBcAg18-27V和HBcAg18-27I兩條多肽刺激后分泌IFN—γ的陽(yáng)性斑點(diǎn)數(shù)，分析比較兩組間治療后和治療前、后各組平均反應(yīng)強(qiáng)度應(yīng)答變化。 結(jié)果： 1．顯性感染組HLA—A2基因分布頻率為52.1％(38/73)；隱性感染組HLA—A2基因分布頻率為51.7％(31/60)；攜帶組H

4、LA—A2基因分布頻率為49.1％(26/53)；對(duì)照組HLA—A2基因分布頻率為50.0％(15/30)，各組間HLA—A2基因分布頻率無(wú)顯著差異(P＞0.05)。 2．各組HLA—A2陽(yáng)性者特異性CTL功能的ELISPOT撿測(cè)結(jié)果： (1)各組對(duì)兩條多肽的應(yīng)答比例相似；隱性感染組對(duì)兩條多肽的應(yīng)答比例明顯高于顯性感染組(P＜0.05)；兩組顯著高于無(wú)癥狀攜帶組和對(duì)照組(P＜0.05)；而后兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.0

5、5)。 (2)各組對(duì)兩條多肽的平均反應(yīng)強(qiáng)度相似；隱性感染組對(duì)兩條多肽的平均反應(yīng)強(qiáng)度明顯高于顯性感染組(P＜0.05)；兩組顯著高于無(wú)癥狀攜帶組和對(duì)照組(P＜0.05)；而后兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 3．組間比較，治療后完全應(yīng)答組對(duì)兩條多肽的應(yīng)答比例和平均反應(yīng)強(qiáng)度均明顯高于不完全應(yīng)答組(P＜0.05)；治療前兩組無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。組內(nèi)比較，治療后完全應(yīng)答組應(yīng)答比例和平均反應(yīng)強(qiáng)度均明顯高于治療前(

6、P＜0.05)；不完全應(yīng)答組治療前、后無(wú)顯著差異(P＞0.05)。 結(jié)論： 1．各組間HLA—A2基因分布頻率無(wú)差別。HBV感染表現(xiàn)形式或轉(zhuǎn)歸與HLA—A2基因分布無(wú)明顯關(guān)系。 2．不同表現(xiàn)形式的HBV感染者外周血HBcAg特異性CTL經(jīng)特異性抗原多肽(HBcAg18-27V/I)刺激后分泌。IFN—γ的水平不同，隱性感染者的自愈和清除病毒可能與其應(yīng)答水平較高有關(guān)。 3．核苷類(lèi)藥物抗病毒治療可增強(qiáng)HBcA