半枝蓮藥材和注射用銀杏葉提取物質(zhì)量研究.pdf

1、一、半枝蓮藥材指紋圖譜研究 目的：建立中藥材半枝蓮的HPLC指紋圖譜，獲得對照圖譜，并與不同產(chǎn)地半枝蓮藥材指紋特征相比較，為科學(xué)評價與有效控制半枝蓮藥材質(zhì)量提供新方法。 方法：(1)提?。罕容^了不同提取方法、提取溶劑及提取時間的提取效果，選擇提取成分較多，提取率較高的提取條件。(2)色譜條件：選用合適的色譜柱及檢測器，調(diào)整流動相的組成、配比、流速，調(diào)節(jié)柱溫，選擇最佳的色譜條件，使色譜圖符合指紋圖譜研究的要求。(3)系統(tǒng)適

2、用性試驗：在已確定的色譜條件下，考察指紋圖譜中參照物野黃芩苷峰的分離度和理論板數(shù)。(4)精密度試驗：取同一份供試品溶液，重復(fù)進樣6次，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的相似度。(5)重復(fù)性試驗：取同一批半枝蓮藥材6份，平行制備供試品溶液，分別進樣，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的相似度。(6)穩(wěn)定性試驗：取同一份供試品溶液分別于0、2、4、6、8、24、36、48h進樣，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的

3、相似度。(7)指紋圖譜的建立：分別取不同產(chǎn)地的半枝蓮藥材23批、對照藥材1批和混淆品6批樣品制備供試品溶液，進行指紋圖譜分析。 結(jié)論：本文建立了中藥材半枝蓮的HPLC-UV指紋圖譜，并與不同產(chǎn)地的半枝蓮藥材及其混淆品進行了比較，利用相似度軟件對不同產(chǎn)地半枝蓮藥材間的差異進行了研究，對其質(zhì)量進行了綜合評價，方法重復(fù)性和精密度良好，有助于半枝蓮藥材的標準化種植及質(zhì)量控制。 二、半枝蓮中黃酮類成分的含量測定 目的：建立

4、高效液相色譜法測定半枝蓮中6種黃酮類成分的含量，同時測定各樣品中總黃酮的含量，為半枝蓮藥材的質(zhì)量評價提供有效手段和依據(jù)。 方法： 1.六種黃酮類成分同時測定(1)提?。罕容^不同提取方法、提取溶劑及提取時間的提取效果，選擇提取高的提取條件。(2)色譜條件：選用合適的色譜柱，調(diào)整流動相的組成、配比、流速，使各待測成分色譜峰的分離度均符合測定的要求。(3)標準曲線的制備：配制一系列濃度的混合對照品溶液，測定峰面積；以峰面積為縱

5、坐標，以濃度為橫坐標，繪制標準曲線，經(jīng)回歸處理得各標準曲線方程。(4)檢測限試驗：將混合對照品溶液逐步稀釋，當信噪比S/N≥3時確定為檢測限。(5)精密度試驗：取同一份樣品溶液，重復(fù)進樣6次，測定峰面積，計算儀器精密度；取同一樣品，每日精密稱取6份，制備溶液，進樣測定，連續(xù)測定3日。根據(jù)測定結(jié)果分別計算日內(nèi)精密度和日間精密度。(6)穩(wěn)定性試驗：取樣品溶液分別于0、2、4．6、8、24h進樣測定。(7)回收率試驗：取已知含量的藥材9份，每

6、份約O．1g，精密稱定，分別精密加入一定量的對照品，制備供試品溶液，進樣測定高、中、低3種濃度的回收率。(8)樣品測定：在上述色譜條件下，測定不同來源半枝蓮藥材中各待測成分的含量。 2.總黃酮的測定(1)標準曲線的制備：配制一系列濃度的混合對照品溶液，測定吸光度；以野黃芩苷的濃度(mg·mL<'-1>)為橫坐標，相應(yīng)的吸光度值為縱坐標，制備標準曲線。(2)樣品測定：依法制備各供試品溶液，測定所有半枝蓮藥材中總黃酮的含量。

7、 結(jié)論：本研究首次建立了高效液相色譜法同時測定半枝蓮中六種黃酮類成分的含量。采用波長轉(zhuǎn)換法以各待測組分的最大吸收波長作為相應(yīng)組分的檢測波長，提高了檢測靈敏度，方法簡便快速、結(jié)果準確可靠，專屬性強，精密度和穩(wěn)定性良好，可用于半枝蓮中黃酮類成分的質(zhì)量控制。 三、半枝蓮中原兒茶酸的含量測定。 目的：建立高效液相色譜法測定半枝蓮中原兒茶酸的含量，為半枝蓮藥材的質(zhì)量評價提供有效手段。 方法：(1)提取：比較不同的提取方法，

8、并對各種影響因素進行考察，選擇最佳的提取條件。(2)色譜條件：選用合適的色譜柱，調(diào)整流動相的組成、配比、流速，使原兒茶酸色譜峰的分離符合測定的要求。(3)標準曲線的制備：配制一系列濃度的原兒茶酸對照品溶液，測定峰面積；以原兒茶酸的含量為橫坐標，相應(yīng)的峰面積(×10<'7>)為縱坐標，制備標準曲線。(4)檢測限試驗：將原兒茶酸對照品溶液逐步稀釋，當信噪比S/N≥3時確定為檢測限。(5)穩(wěn)定性試驗：取樣品溶液分別放置0、2、4、6、8、12

9、、24h后進樣測定峰面積。(6)精密度試驗：取同一份樣品溶液，重復(fù)進樣6次，測定峰面積。(7)重復(fù)性試驗：．取半枝蓮藥材平行制備樣品溶液6份，測定峰面積，計算各供試品溶液中原兒茶酸含量，求得其RSD。(8)回收率試驗：取已知原兒茶酸含量的半枝蓮藥材，分別加入適量的原兒茶酸對照品，各平行制備同一濃度的樣品6份。(9)樣品測定：在上述色譜條件下，由標準曲線計算得到各個樣品中原兒茶酸的含量。 結(jié)論：本文首次建立了高效液相色譜法測定半枝

10、蓮中原兒茶酸含量的方法。該法簡便快速、結(jié)果準確可靠，專屬性強，精密度和穩(wěn)定性良好，可用于半枝蓮中原兒茶酸的質(zhì)量控制。 一、注射用銀杏葉提取物指紋圖譜研究 目的：建立注射用銀杏葉提取物的HPLC指紋圖譜，獲得對照圖譜，并與不同批次指紋特征相比較，有效控制注射用銀杏葉提取物的質(zhì)量。 方法：(1)色譜條件：選用合適的色譜柱，調(diào)整流動相的組成、配比、流速，選擇最佳的色譜條件，使色譜圖符合指紋圖譜研究的要求。(2)系統(tǒng)適用

11、性試驗：在已確定的色譜條件下，考察指紋圖譜中參照物蘆丁峰的分離度和理論板數(shù)。(3)專屬性試驗：精密吸取陰性對照溶液、供試品溶液及對照品溶液，進樣，記錄75min內(nèi)的色譜圖。(4)精密度試驗：取同一份供試品溶液，重復(fù)進樣6次，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的相似度。(5)重復(fù)性試驗：取平均裝量項下內(nèi)容物6份，制備供試品溶液，進樣，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的相似度。(6)穩(wěn)定性試驗：取同一份供試品溶液分別于0、

12、2、4、6、8、24h進樣，記錄保留時間和峰面積，同時比較所得指紋圖譜的相似度。(7)指紋圖譜的建立：分別取原料、中間體及注射用銀杏葉提取物各10批制備供試品溶液，進行指紋圖譜分析。(8)數(shù)據(jù)分析：運用相似度軟件對所得數(shù)據(jù)進行分析。 結(jié)論：本文建立了注射用銀杏葉提取物的HPLC-UV指紋圖譜，并與不同批次進行了比較，利用相似度軟件對不同批次注射用銀杏葉提取物藥材間的差異進行了研究，方法重復(fù)性和精密度良好，有助于注射用銀杏葉提取物

13、的質(zhì)量控制。 二、注射用銀杏葉提取物總黃酮醇苷的含量測定 目的：建立高效液相色譜法測定注射用銀杏葉提取物中總黃酮醇苷的含量，為注射用銀杏葉提取物的質(zhì)量評價提供有效手段。 方法：(1)色譜條件：選用合適的色譜柱，調(diào)整流動相的配比，使各待測成分色譜峰的分離度均符合測定的要求。(2)系統(tǒng)適用性試驗：在已確定的色譜條件下，考察色譜圖中各待測物峰的分離度，按槲皮素峰計算理論板數(shù)。I(3)專屬性試驗：精密吸取陰性對照溶液、供

14、試品溶液及對照品溶液，進樣，記錄45min內(nèi)的色譜圖。(4)標準曲線的制備：配制一系列濃度的混合對照品溶液，測定峰面積；以峰面積為縱坐標，以濃度為橫坐標，繪制標準曲線，經(jīng)回歸處理得各標準曲線方程。(5)檢測限試驗：將混合對照品溶液逐步稀釋，當信噪比S/N≥3時確定為檢測限。(6)精密度試驗：取同一份樣品溶液，重復(fù)進樣6次．測定峰面積。(7)重復(fù)性試驗：取同一批樣品6份，制備供試品溶液，進樣測定。(8)穩(wěn)定性試驗：取樣品溶液分別于0、2、

15、4、6、8、24h進樣測定。(9)回收率試驗：取已知含量的樣品6份，每份約0.22g，精密稱定，分別精密加入一定量的對照品，制備供試品溶液，進樣測定。(10)樣品測定：取原料、中間體及注射用銀杏葉提取物各10批分別制備供試品溶液，進樣測定，計算含量。 結(jié)論：本研究采用高效液相色譜法測定了注射用銀杏葉提取物黃酮類成分的含量。方法簡便快速、結(jié)果準確可靠，專屬性強，精密度和穩(wěn)定性良好，可用于注射用銀杏葉提取物中黃酮類成分的質(zhì)量控制。

16、 三、注射用銀杏葉提取物萜類內(nèi)酯的含量測定 目的：建立高效液相色譜法測定注射用銀杏葉提取物中萜類內(nèi)酯的含量，為注射用銀杏葉提取物的質(zhì)量評價提供有效手段。 方法：(1)選用合適的色譜柱，調(diào)整流動相的組成、配比、流速，使各待測成分色譜峰的分離度均符合測定的要求。(2)系統(tǒng)適用性試驗：在己確定的色譜條件下，考察色譜圖中各待測物峰的分離度，按白果內(nèi)酯峰計算理論板數(shù)。(3)專屬性試驗：精密吸取陰性對照溶液、供試品溶液及對照品

17、溶液，進樣，記錄25min內(nèi)的色譜圖。(4)標準曲線的制備：配制一系列濃度的混合對照品溶液，測定峰面積；以峰面積對數(shù)為縱坐標，以濃度對數(shù)為橫坐標，繪制標準曲線，經(jīng)回歸處理得各標準曲線方程。(5)檢測限試驗：將混合對照品溶液逐步稀釋，當信噪比S/N≥3時確定為檢測限。(6)精密度試驗：取同一份樣品溶液，重復(fù)進樣6次，測定峰面積。(7)重復(fù)性試驗：取同一批樣品6份，制備供試品溶液，進樣測定。(8)穩(wěn)定性試驗：取樣品溶液分別于0、2、4、6、