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文檔簡介
1、涎腺腺樣囊性癌是最常見的涎腺上皮惡性腫瘤之一,嗜神經(jīng)侵襲及較易遠處轉(zhuǎn)移是它獨特的生物學(xué)特征,也是其遠期預(yù)后不佳的最重要原因之一。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)在口腔惡性腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了關(guān)鍵的作用,E-cadherin的下調(diào)是國際公認的EMT標志。而Slug作為鋅指轉(zhuǎn)錄因子家族重要成員,在腫瘤組織中的表達水平顯著高于正常組織。Slug通過調(diào)控腫瘤細胞的EMT過程,影響腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移,并與腫瘤的預(yù)后關(guān)系密切。EMMPRIN是在人體分布廣
2、泛的一種跨膜糖蛋白,其可通過多種途徑促進SACC的局部侵襲和遠處轉(zhuǎn)移。研究表明在肝細胞癌的發(fā)展中Slug、EMMPRIN和E-cadherin的表達存在密切相關(guān)性,但Slug、EMMPRIN和E-cadherin在SACC的發(fā)生和發(fā)展過程中的相關(guān)性研究尚未見報道,需進一步研究。
實驗一
目的:研究Slug、EMMPRIN和E-cadherin在SACC臨床標本中的表達情況及其與臨床病理特征間的關(guān)系。
方法:
3、應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法檢測115例SACC患者組織中Slug、EMMPRIN和E-cadherin的表達情況,并分析其與臨床病理特點間的關(guān)系,應(yīng)用SPSS17.0軟件包對實驗結(jié)果進行Fisher確切概率檢驗。
結(jié)果:免疫組化結(jié)果顯示Slug和EMMPRIN在組織切片中強陽性表達,陽性率分別為76.5%和69.6%;E-cadherin弱陽性表達,陽性率為51.3%。Slug和EMMPRIN的表達與SACC腫瘤病理分型、臨床分
4、期、神經(jīng)侵襲、復(fù)發(fā)、遠處轉(zhuǎn)移呈顯著正相關(guān)(P<0.05),E-ca黏蛋白的表達與腫瘤病理分型、臨床分期、神經(jīng)侵襲、遠處轉(zhuǎn)移呈顯著負相關(guān)(P<0.05)。同時,Slug的表達與EMMPRIN的表達呈顯著正相關(guān)(P<0.05),EMMPRIN的表達與E-cadherin的表達呈顯著的負相關(guān)(P<0.05),Slug的表達與E-cadherin的表達呈顯著的負相關(guān)(P<0.05)。
結(jié)論:Slug、EMMPRIN和E-cadheri
5、n在SACC中的表達具有顯著的相關(guān)性,三者的表達與SACC的臨床病理特征密切相關(guān)。
實驗二
目的:探討Slug,EMMPRIN和E-ca在SACC細胞系中的表達相關(guān)性及對SACC生物學(xué)特性的影響。
方法:構(gòu)建兩種重組質(zhì)粒載體(si-Slug,si-EMMPRIN),重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SACC-83細胞,并分成四組(G1:空白對照組;G2:si-Slug;G3:si-EMMPRIN;G4:si-Slug and s
6、i-EMMPRIN)。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后進行RT-PCR,Western Blot,形態(tài)學(xué)觀察,劃痕實驗,侵襲實驗,遷徙實驗等實驗,并對結(jié)果進行分析。
結(jié)果:沉默Slug能顯著下調(diào)Slug和EMMPRIN的mRNA和蛋白表達水平(P<0.01),沉默EMMPRIN可顯著下調(diào)EMMPRIN的mRNA和蛋白表達水平,但對Slug的mRNA和蛋白表達水平無顯著影響(P<0.01);沉默Slug、EMMPRIN均使SACC細胞EMT能力降低;
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