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1、目的:在本課題組前期證實(shí)的Notch基因家族中,Notch-1和涎腺腺樣囊性癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究Notch信號(hào)通路的其它基因與涎腺腺樣囊性癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。 方法:在查閱Notch信號(hào)通路相關(guān)基因的基礎(chǔ)上,根據(jù)前期構(gòu)建的涎腺腺樣囊性癌高低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株基因表達(dá)譜,運(yùn)用生物信息學(xué)的方法,初步篩選出Notch信號(hào)通路基因在涎腺腺樣囊性癌基因表達(dá)譜中所涉及的基因,采用real-time PCR方法,驗(yàn)證這些基因在ACC-M、ACC
2、-2兩細(xì)胞株中的表達(dá)水平,并采用免疫組化方法進(jìn)一步檢驗(yàn)這些差異基因在有無(wú)轉(zhuǎn)移的涎腺腺樣囊性癌組織中的表達(dá)差異。 結(jié)果:通過(guò)對(duì)涎腺腺樣囊性癌基因表達(dá)譜進(jìn)行生物信息學(xué)分析,查找Notch信號(hào)通路所有基因,比對(duì)后發(fā)現(xiàn)Notch信號(hào)通路和涎腺腺樣囊性癌相關(guān)基因共46種。Real-time PCR方法檢測(cè)這些基因在ACC-M、ACC-2兩細(xì)胞株的表達(dá),發(fā)現(xiàn)其中RUNX1、Notch-1、Notch-2、Notch-4在ACC-M中的表達(dá)高
3、于ACC-2(P<0.05);CHUK、FOXC1、FZD2、FZD3、GBP2在ACC-M中的表達(dá)低于ACC-2(P<0.05),其余基因在兩細(xì)胞株中的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:這9種基因在轉(zhuǎn)移和非轉(zhuǎn)移的涎腺腺樣囊性癌標(biāo)本中的表達(dá)存在差異(P<0.05),結(jié)果與Real-time PCR的結(jié)果一致。 結(jié)論:Notch信號(hào)通路在涎腺腺樣囊性癌的發(fā)展過(guò)程中起著一定的作用,CHUK、FOXC1、
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