苦參主要成分的分離提取及其抗犬流感病毒的研究.pdf

1、犬流感是由犬流感病毒(Canine influenza virus，CIV)引起的以體溫升高、咳嗽、呼吸困難為特征的犬的急性傳染性疾病，其特點是傳播快，流行廣。我國和韓國都在呼吸道嚴重感染犬中分離到H3N2亞型流感病毒，實驗發(fā)現(xiàn)這種病毒可以在犬之間進行直接傳播。在現(xiàn)代生活中，犬是人類的忠實朋友，近年來寵物犬數(shù)量急劇增加，這也為犬流感病毒的跨宿主傳播提供了更多的機會，人們需要重視這一問題。
　　西藥在抗犬流感病毒的臨床應用上尚存在極

2、大的局限性，如降低畜禽免疫力，易產生抗藥性、具有副作用等。中藥毒副作用小、不易產生耐藥性，近年來的研究逐漸增多。但是把中藥的藥理活性、有效成分與藥物的基礎功效結合起來進行綜合性研究的報道仍較少見。本課題基于前期研究成果即中藥苦參具有良好的體外抗犬流感病毒效果的結論，以苦參為原材料，進行苦參主要成分的抗流感病毒效果研究。本試驗采用稀醇提取、大孔樹脂純化法，從苦參中獲得了主要成分即生物堿類，黃酮類，皂苷類和多糖類化合物。用MDCK細胞建立體

3、外實驗模型，將苦參提取物進行有效處理，制成可用于MDCK細胞的藥物制劑，以利巴韋林為陽性對照，應用細胞病變觀察法和MTT法檢測細胞活性，對苦參成分的抗犬流感病毒效果進行評價。首先測定各成分對MDCK的最大無毒濃度，然后在安全濃度范圍內比較四種成分的抗犬流感病毒效果，通過改變給藥時間及作用方式初步探討有效成分抗犬流感病毒的作用環(huán)節(jié)，最后確定其最小有效濃度。
　　結果表明:苦參四種主要成分的最大安全濃度在3.344μg/mL～1.22

4、9 mg/mL之間。四種主要成分均有顯著的抗CIV效果(P＜0.05)且綜合作用效果均優(yōu)于利巴韋林。
　　不同給藥方式試驗結果顯示:(1)苦參四種成分均能阻止CIV吸附進入細胞，且效果均顯著優(yōu)于利巴韋林(P＜0.05)，生物堿和皂苷類的效果優(yōu)于其他兩種成分;(2)苦參四種成分均能干擾CIV的合成與釋放;(3)病毒和藥物同時接觸細胞時，苦參四種成分均能起到抑制CIV的作用，生物堿類與利巴韋林作用相近，但黃酮、皂苷、多糖類成分的效果顯