口唇粘膜移植眼表重建的臨床療效及其術后上皮特性的研究.pdf

1、目的:擬創(chuàng)建一種全新的口唇粘膜移植重建眼表的手術技術，重建疤痕期眼表角膜緣功能，矯正瞼球粘連，并行二期光學性角膜移植。通過臨床病例隨訪分析及手術標本的實驗室研究，評估手術療效并探討術后眼表上皮細胞的形態(tài)和性質。
　　方法:研究對象為2011年8月至2014年3月期間在我院眼科住院接受口唇粘膜移植眼表重建手術的疤痕期眼表疾病患者。對患者主觀不適癥狀（包括畏光、疼痛、干眼）、視力、瞼球粘連程度、新生血管程度及角膜混濁度進行等級評分并進

2、行術前術后比較，評估手術療效。對部分眼表成功重建的病例行二期光學性角膜移植手術，觀察術后的視力、眼表上皮、新生血管以及植片情況等。同時通過眼表印記細胞、二期角膜移植手術標本的組織病理切片、免疫組織化學染色和掃描電鏡等實驗室技術，對術后眼表上皮細胞的形態(tài)和性質進行探討和研究。
　　結果:
　　1.第一部分結果
　　共計88例患者(89眼)被納入研究，平均年齡42.78±12.40歲，其中男性77人(86.5％)。病因包括

3、化學燒傷47眼(52.8％)，熱燒傷33眼(37.1％)，爆炸傷3眼(3.4％)，Steven-Johnson綜合征3眼(3.4％)和多發(fā)胬肉3眼(3.4％)。平均隨訪355.9±233.8天，最長達847天，43.8％的病例隨訪超過1年。其中52眼(58.4％)施行了全周口唇粘膜移植，37眼(41.6％)行部分范圍的口唇粘膜移植，5例病人因剩余角膜基質過薄聯合了深板層角膜移植術或板層角膜移植術，所有病例術后粘膜植片生長良好。術后20眼

4、并發(fā)羊膜下積血，平均31.89±19.90天完全吸收，未見其他術中及術后并發(fā)癥及不良事件，口唇切口約9天愈合，患者無不適主訴及并發(fā)癥。術后74眼(83.1％)主觀不適癥狀較術前改善，術后評分1.02±0.64較術前2.24±1.09明顯下降(P＜0.01)，其中畏光、疼痛、干眼的改善率分別為84.7％、76.4％、69.1％;43眼(48.3％)視力較術前提高;84眼(94.3％)角膜新生血管程度下降，血管深度和范圍分別較術前下降1.4

5、8±0.83和0.99±0.87個等級(P＜0.01);術前瞼球粘連眼（57眼）術后皆得到改善，瞼球粘連程度較術前平均下降1.44±0.69個等級(P＜0.01)，長期隨訪過程僅5眼(8.8％)有局部復發(fā);25眼(28.9％)角膜混濁度較術前下降。粘膜移植術后，88眼(98.9％)上皮化完成，平均需時29.95±61.13天，其中12眼(14.6％)術后早期出現小范圍反復持續(xù)性上皮缺損(PED)，經過輔助治療恢復穩(wěn)定無并發(fā)癥，1眼(1.

6、1％)持續(xù)存在PED至末次隨訪（501天）并發(fā)局部基質浸潤。相關性分析示上皮化完成時間與以下因素相關:術前眼表不適癥狀(r=0.336，P＜0.01)、術前PED(r=0.364，P＜0.01)、角膜混濁程度(r=0.331，P＜0.01)及角膜緣干細胞缺失范圍(r=0.375，p＜0.01)。
　　2.第二部分結果
　　口唇粘膜移植術后15眼接受了姚氏法全植床深板層角膜移植(Yao's-DLK)，4眼接受了穿透性角膜移植(

7、PKP)，平均隨訪305.1±152.4天。所有病例植片生長良好，內皮細胞密度監(jiān)測平穩(wěn)，未見排斥反應。術后角膜混濁度、新生血管程度較一期術后進一步降低。其中16眼(84.2％)視力較術前提高，13眼(68.4％)由術前的手動或指數提高至0.05及以上，8眼(42.1％)至0.2及以上。術后早期有7眼(36.8％)上皮出現小范圍上皮持續(xù)缺損(PED)，輔助治療后6眼上皮恢復穩(wěn)定，1眼持續(xù)缺損至末次隨訪（461天），其中4眼并發(fā)局部基質浸潤

8、混濁，有3眼對視力產生影響。DLK術中并發(fā)癥有后彈力層小穿孔至術后雙前房1眼，術后1月自行恢復;PKP術后并發(fā)癥有激素性青光眼1眼，改用低濃度激素后好轉;并發(fā)性白內障1眼，隨訪病情穩(wěn)定。
　　3.第三部分結果
　　眼表印記細胞學檢查示口唇粘膜移植術后眼表上皮形態(tài)學上皆不同于三種上皮（口唇粘膜上皮、角膜上皮和結膜上皮）。術后眼表不同部位的細胞大小、形態(tài)、排列、層數、染色、核質比等皆不同，角膜中央部位的細胞較周邊部位分化更好，術

9、后時間越長，眼表細胞分化越好。手術標本石蠟切片HE染色示術后上皮的層數多于正常角膜但少于口唇粘膜，周邊上皮較厚，中央上皮較薄。部分移植的病例上皮分化較全周移植的好，上皮更接近正常角膜。掃描電鏡結果示口唇粘膜移植術后眼表上皮的超微機構皆不同于三種上皮;中央部位上皮微絨毛分化較周邊部位更明顯，部分移植的病例較全周移植更接近角膜上皮。免疫組織化學染色結果示新生上皮來源于口唇粘膜，但兼具角膜上皮和口唇粘膜上皮的部分特性，且有著豐富的上皮干細胞層