土霉素對(duì)異育銀鯽毒性和殘留研究.pdf

1、本試驗(yàn)以異育銀鯽(Allogynogeneticcrucian)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，首先進(jìn)行了土霉素對(duì)異育銀鯽的急性毒性試驗(yàn)，并在此基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)了6組不同土霉素劑量的飼料(0、100、250、625、1563、3907mg/kg)并進(jìn)行喂養(yǎng)試驗(yàn)，通過測(cè)定對(duì)生長、生理生化、指標(biāo)的研究，探討其對(duì)異育銀鯽的生理和毒理學(xué)影響。同時(shí)，通過測(cè)定土霉素在異育銀鯽組織中的殘留消除規(guī)律，為水產(chǎn)品的食用安全性提供科學(xué)依據(jù)。 1.以體重為45.7±5g的異育

2、銀鯽為試驗(yàn)材料，26℃條件下，測(cè)定腹腔注射土霉素的24h，48h，96h的死亡率。結(jié)果表明腹腔注射后的24h，48h，96hLD50分別為1.90g/kg、1.30g/kg、1.20g/kg，初步表明土霉素對(duì)異育銀鯽為低毒。 2.通過對(duì)6組異育銀鯽投喂添加不同劑量土霉素的飼料，于試驗(yàn)的第2、4、6、8周末取樣測(cè)定土霉素對(duì)異育銀鯽的生長、魚體營養(yǎng)成分及肝胰臟和腸道內(nèi)消化酶的活性的影響。結(jié)果表明：除劑量為100mg/kg劑量組魚體粗

3、蛋白較對(duì)照組有顯著的影響(P<0.05)和250me/kg劑量組中粗脂肪較對(duì)照組有顯著影響，其他劑量組中魚體成分均較對(duì)照組無顯著變化，且劑量高于625mg/kg時(shí)對(duì)異育銀鯽的生長呈輕微抑制作用。試驗(yàn)前期(0～4周)，土霉素對(duì)消化酶活性均呈促進(jìn)作用；試驗(yàn)后期(4～8周)，高于250mg/kg劑量組腸道蛋白酶活性在劑量時(shí)呈抑制作用，肝胰臟脂肪酶活性和淀粉酶也都隨劑量增加而逐漸減小，腸道內(nèi)脂肪酶和淀粉酶活性則變化不明顯。 3.通過對(duì)6

4、組異育銀鯽投喂添加不同劑量土霉素的飼料，于試驗(yàn)的第2、4、6、8周末取樣，測(cè)定土霉素對(duì)異育銀鯽肝胰臟中的SOD、CAT、GSH-Px的活性，MDA的含量及Na+/K+-ATP酶活性的影響。結(jié)果表明，在喂養(yǎng)試驗(yàn)初期，各劑量組SOD、CAT、GSH-PX的活性均被誘導(dǎo)，MDA含量變化不明顯；試驗(yàn)后期，劑量高于250mg/kg，SOD活性逐漸降低；CAT活性隨著劑量的增加先升后降，但仍然高于對(duì)照組；GSH-Px活性呈上升趨勢(shì)，并在劑量組156

5、3mg/kg和3907mg/kg處升高明顯；肝胰臟中MDA含量較對(duì)照組有顯著的增加。Na+/K+-ATP酶活性則不斷降低。上述結(jié)果表明，當(dāng)土霉素劑量低于250mg/kg時(shí)，異育銀鯽體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)會(huì)誘導(dǎo)抗氧化酶活性的增加清除體內(nèi)的氧自由基；高于此劑量會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)失衡，肝胰臟和鰓組織受損。 4.通過對(duì)6組異育銀鯽(Allogynogeneticcrucian)投喂添加不同劑量土霉素的飼料(0、100、250、625、15

6、63、3907mg/kg)，飼養(yǎng)兩個(gè)月后，測(cè)定了土霉素對(duì)異育銀鯽血清生理生化指標(biāo)的影響，同時(shí)采用聚丙烯酰胺凝膠電泳等方法，對(duì)不同劑量組異育銀鯽的肝胰臟和腎臟內(nèi)EST同工酶和SOD同工酶進(jìn)行了電泳分析，以了解土霉素對(duì)異育銀鯽的毒性機(jī)理。結(jié)果表明：小于250mg/kg劑量的土霉素對(duì)血清生化指標(biāo)都沒有顯著影響，大于250mg/kg劑量的土霉素能引起谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的降低，總蛋白和白蛋白含量減少，而甘油三酯、葡萄糖、總膽固醇、尿素氮、肌酐和血清鉀

7、離子含量都較對(duì)照組明顯升高，肝胰臟和腎臟的兩種同工酶活性都較對(duì)照組明顯減小，肝功能和腎臟機(jī)能明顯發(fā)生障礙。 5.通過對(duì)6組異育銀鯽(Allogynogeneticcrucian)投喂添加不同劑量土霉素的飼料(0、100、250、625、1563、3907mg/kg)，飼養(yǎng)兩個(gè)月后，測(cè)定了土霉素對(duì)異育銀鯽脾臟指數(shù)，頭腎指數(shù)，血清抗菌活力和溶菌酶活力，以評(píng)價(jià)土霉素對(duì)異育銀鯽非特異性免疫功能的影響。結(jié)果表明：土霉素對(duì)異育銀鯽的異育銀鯽

8、的免疫器官指數(shù)和抗菌活力的變化都沒有明顯的影響，僅最高劑量組溶菌酶活力有明顯的下降。土霉素對(duì)異育銀鯽免疫器官發(fā)育沒有明顯的影響，僅對(duì)非特異性免疫功能有輕微的影響。 6.利用高效液相色譜法研究土霉素在異育銀鯽肝胰臟、肌肉中的殘留與消除規(guī)律，利用高效液相色譜法研究土霉素在異育銀鯽肝胰臟、肌肉中的殘留與消除規(guī)律，確定了合適的色譜條件：流動(dòng)相為乙腈/0.01mol/L磷酸二氫鈉水溶液(體積比77:23)，pH2.5，355nm檢測(cè)波長下