潰結(jié)湯對大鼠潰瘍性結(jié)腸炎治療作用及腸粘膜MMP-9影響的研究.pdf

1、目的:潰瘍性結(jié)腸炎(uC)的病因及發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清楚,但是和UC 相關(guān)的細(xì)胞及分子水平的機(jī)理研究已經(jīng)有了很大進(jìn)展.許多證據(jù)表明細(xì)胞因子在UC的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用.各種腸道炎癥動物模型研究顯示,抑制前炎癥細(xì)胞因子可以緩解腸道炎癥.方法:1.UC動物模型的建立:取50只健康成年Wistar大鼠(體重270±209,雌雄各半),應(yīng)用復(fù)合法(2,4-二硝基氯苯+乙酸)制備細(xì)胞免疫反應(yīng)性UC大鼠模型.2.動物分組及處理:取己造模成功Wi

2、star大鼠40只,隨機(jī)均分為模型組、KJT低劑量組、KJT高劑量組、SASP組,并設(shè)正常對照組Wistar大鼠10只.KJT低劑量組和KJT高劑量組分別以KJT生藥10g/kg、20g/kg煎成湯 劑灌胃,SASP組以SASP0.2g/kg用蒸餾水制成懸液灌胃,模型組及正常對照組給予等量生理鹽水灌胃.各組大鼠均灌胃2周并觀察大鼠臨床表現(xiàn),然后以10﹪水合氯醛(350mg/kg體重)腹腔注射麻醉,剖取距肛門2-10cm結(jié)腸,共8cm沿腸

3、系膜緣剪開腸腔,用生理鹽水清洗干凈,稱量結(jié)腸重量,而后平展于8倍放大鏡下,進(jìn)行肉眼觀察和形態(tài)學(xué)分析,然后,用已消毒鋒利刀片切取5×l0mm大小的結(jié)腸組織(模型組包括部分結(jié)腸潰瘍創(chuàng)面在內(nèi)),浸泡于4﹪多聚甲醛,用于HE及免疫組化染色.另外,切取3×3mm大小的結(jié)腸組織(模型組包括部分結(jié)腸潰瘍創(chuàng)面在內(nèi)),浸泡于2﹪(pH72-7.4 )戊二醛中固定,置于4℃冰箱.用于SEM樣品制備.3.觀察指標(biāo):(1)結(jié)腸重量(2)大體形態(tài)粘膜損傷程度評分