血清microRNA作為乳腺癌診斷標(biāo)志物的研究.pdf

1、目的:乳腺癌是女性最常見的癌癥類型，是導(dǎo)致女性癌癥相關(guān)死亡的主要原因之一。乳腺癌治療的成功很大程度上取決于患者確診時(shí)疾病的分期情況，早期診斷乳腺癌是改善預(yù)后的有效措施。但目前乳腺癌的診治中缺乏敏感性特異性較好的非侵入性標(biāo)志物用于早期診斷。microRNA，是一類長(zhǎng)約22個(gè)核苷酸的小分子單鏈RNA，并在外周血中穩(wěn)定存在，日益成為一種新興的生物標(biāo)志物。本研究以乳腺癌的早期診斷為目的，通過篩選手術(shù)前后明顯改變的microRNA譜，研究其作為乳

2、腺癌血清標(biāo)志物的診斷價(jià)值。
　　方法:以乳腺癌患者及對(duì)照人群血清樣本中游離microRNA為研究對(duì)象，運(yùn)用高通量芯片表達(dá)分析篩選手段，著重立足于同一患者手術(shù)前后（暨瘤體移除前后）有明顯改變的microRNA;芯片篩選出的差異microRNA進(jìn)一步運(yùn)用Taqman探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分別在訓(xùn)練集以及驗(yàn)證集2個(gè)獨(dú)立樣本中進(jìn)行驗(yàn)證其表達(dá)水平。在訓(xùn)練集中評(píng)估m(xù)icroRNA的診斷價(jià)值，敏感度、特異度以及ROC曲線均用于評(píng)估其診斷效

3、能。驗(yàn)證集被用來(lái)進(jìn)一步證實(shí)訓(xùn)練集中有診斷價(jià)值的microRNA以及聯(lián)合microRNA譜的診斷價(jià)值。
　　結(jié)果:通過高通量芯片篩選策略統(tǒng)計(jì)分析，訓(xùn)練集以及驗(yàn)證集實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)血清miR-130b-5p、miR-151a-5p、miR-206、miR-222-3p在乳腺癌患者與對(duì)照組中的表達(dá)具有顯著的差異，具有潛在的乳腺癌診斷價(jià)值。我們通過logistic regression回歸，繪制接受者工作曲線，分別計(jì)算得出4個(gè)mi

4、croRNA的接受者工作曲線的曲線下面積，診斷敏感度和特異度。（miR-130b-5p:訓(xùn)練集，AUC=0.7486，敏感度60.87％，特異度86.96％;驗(yàn)證集，AUC=0.7276，敏感度73.21％，特異度72.09％。miR-151a-5p:訓(xùn)練集，AUC=0.7599，敏感度61.90％，特異度79.17％;驗(yàn)證集，AUC=0.7959，敏感度76.79％，特異度75.00％。miR-206:訓(xùn)練集，AUC=0.7302，敏

5、感度52.38％，特異度87.50％;驗(yàn)證集，AUC=0.8605，敏感度72.55％，特異度86.05％。miR-222-3p:訓(xùn)練集，AUC=0.7066，敏感度66.67％，特異度70.83％;驗(yàn)證集，AUC=0.8860，敏感度85.71％，特異度79.55％）將4個(gè)microRNA聯(lián)合起來(lái)，其診斷價(jià)值更好，并且具有相對(duì)更好的敏感度與特異度（4個(gè)microRNA聯(lián)合診斷價(jià)值，訓(xùn)練集:AUC=0.8457，敏感度85.00％，特異