副干酪乳桿菌素高產(chǎn)菌株的誘變選育.pdf

1、目前延長食品保存期的主要方法是添加化學防腐劑，而化學防腐劑對人體健康都有或多或少的副作用。因此研究和開發(fā)各種天然、安全的防腐劑是人類健康和社會發(fā)展的需要。而取自于動植物的天然防腐劑，由于受到原料的生產(chǎn)周期及成本的制約，很難規(guī)模化生產(chǎn)。采用微生物發(fā)酵法是生產(chǎn)天然防腐劑的最佳選擇。多種微生物均可產(chǎn)生抑菌物質(zhì)，但作為人類益生菌的乳酸菌產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)，多為安全的肽類，是目前研究的熱點。本課題研究的即是由副干酪乳桿菌(Lactobacillus

2、paracasei HD1.7)產(chǎn)生的抑菌譜廣、適用pH廣的副干酪乳桿菌素，但由于副干酪乳桿菌HD1.7菌株為野生菌株，產(chǎn)量較低，為提高該菌株產(chǎn)抑菌物質(zhì)產(chǎn)量，本課題對此野生菌株進行誘變選育。 本課題采用物理和化學多種誘變育種技術(shù)對副干酪乳桿菌進行選育，利用紫外線誘變、NTG誘變以及微波誘變進行復(fù)合誘變處理，獲得一株高產(chǎn)突變株副干酪乳桿菌素高產(chǎn)突變株W-6，效價從出發(fā)菌株的155AU/mL提高到了614AU/mL，連續(xù)傳五代后仍具

3、有良好的傳代穩(wěn)定性。 試驗對高產(chǎn)突變株W-6的發(fā)酵培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化。首先以MRS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，通過正交設(shè)計對碳源、氮源以及無機鹽濃度進行優(yōu)化，選擇出各組分最適合的濃度，找出最佳發(fā)酵培養(yǎng)基。優(yōu)化后的發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：葡萄糖1.5％、果糖1％、乳糖1％，蛋白胨2％、牛肉膏0.5％、酵母粉0.1％，乙酸鈉0.025％，K2HPO4 0.02％、MgSO4·7H2O 0.01％，MnSO4·H2O 0.0025％，吐溫8