肺涎腺型癌的組織病理及分子病理研究.pdf

1、肺涎腺型癌是一組相對(duì)罕見(jiàn)的肺惡性腫瘤，主要包括腺樣囊性癌和粘液表皮樣癌等，目前相關(guān)研究較少，特別是分子病理方面。
　　本研究主要針對(duì)肺腺樣囊性癌(Pulmonary adenoid cystic carcinoma，PACC)及肺粘液表皮樣癌(Pulmonarymucoepidermoid carcinoma，PMEC)進(jìn)行組織病理及分子病理研究。
　　材料與方法:課題研究分兩部分:
　　第一部分對(duì)我院2000-201

2、4年間27例PACC病例行IHC染色和ISH檢測(cè)，分析其臨床病理特征及HPV感染狀況，并比較34例ACC及55例其它涎腺腫瘤中MYB IHC表達(dá)情況，分析MYB在確診ACC中的價(jià)值。應(yīng)用FISH方法檢測(cè)MYB基因拷貝數(shù)改變情況，并分析MYB與PACC預(yù)后的關(guān)系。10例DNA擴(kuò)增成功的病例通過(guò)Sanger測(cè)序、NGS和QPCR三種方法檢測(cè)EGFR、KRAS、BRAF、ALK、PIK3CA、PDGFRA和DDR27個(gè)基因16個(gè)外顯子突變情況

3、。
　　第二部分是對(duì)我院2000年-2014年期間26例PMEC及8例具有類(lèi)似粘液表皮樣癌結(jié)構(gòu)的肺癌病例進(jìn)行IHC染色，分析其臨床病理特征及診斷和鑒別診斷要點(diǎn)。通過(guò)FISH方法檢測(cè)MAML2基因重排情況及ALK IHC陽(yáng)性病例的ALK基因重排情況，并分析MAML2重排與PMEC預(yù)后的關(guān)系;9例DNA擴(kuò)增成功的病例通過(guò)Sanger測(cè)序、NGS和QPCR三種方法檢測(cè)上述7個(gè)基因16個(gè)外顯子突變情況。
　　結(jié)果第一部分:2014年

4、之前的24例PACC進(jìn)行了臨床病理研究，21例為原發(fā)性，平均年齡49歲，男女比例6∶15，病變均位于氣管或支氣管;其中11例進(jìn)行部分氣道切除手術(shù)，10例切緣陽(yáng)性，10例可見(jiàn)神經(jīng)侵犯。免疫組化BCL-2、CollagenIV、CD117、CK7、P16、P63和SMA全部陽(yáng)性(100％，23/23); P53和TTF-1全部陰性(0/23)。15例原發(fā)性PACC隨訪(fǎng)了4-120個(gè)月（中位隨訪(fǎng)44.8個(gè)月），中位無(wú)復(fù)發(fā)生存期為56.9個(gè)月，

5、5年無(wú)復(fù)發(fā)生存率為48.6％，術(shù)后放療是預(yù)后好的因素(P＜0.05)。3例為轉(zhuǎn)移性，病變均位于肺實(shí)質(zhì)內(nèi)。補(bǔ)充2014年3例新發(fā)病例后進(jìn)行MYB的IHC研究，MYB在19例PACC和9例頭頸部ACC(82.35％，28/34)中陽(yáng)性表達(dá)，在5例對(duì)照組腫瘤(9.09％，5/55)中陽(yáng)性表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。無(wú)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移組病例MYB陽(yáng)性表達(dá)率(66.67％，8/12)低于有復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移組病例(100％，8/8)，原發(fā)性PAC

6、C病例組MYB陽(yáng)性表達(dá)率(76.2％，16/21)低于轉(zhuǎn)移性PACC病例組(100％，3/3)，結(jié)果未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。FISH檢測(cè)發(fā)現(xiàn)2例PACC出現(xiàn)了MYB拷貝數(shù)增加，均為復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移組病例。P16陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)超過(guò)40％的11例病例加作了HPV ISH檢測(cè)，均未發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性信號(hào)(0％，0/11)。10例擴(kuò)增成功的PACC病例，三種方法均未檢測(cè)到7個(gè)基因中16個(gè)外顯子突變(0/10)。
　　第二部分:重新閱片后排除了8例原診斷為PME

7、C的病例后，26例PMEC病例入組，平均年齡46.5歲，男女比例1∶1。18例為低級(jí)別PMEC，8例為高級(jí)別PMEC。顯微鏡下19例為氣道內(nèi)生長(zhǎng)，4例為氣道周?chē)L(zhǎng)并侵及肺實(shí)質(zhì)。26例均未見(jiàn)角化現(xiàn)象，腫瘤間質(zhì)均見(jiàn)不同程度的玻璃樣變性，11例伴有鈣化。免疫組化CK7、MUC5AC和P63全部陽(yáng)性(100％，26/26); EGFR11例陽(yáng)性(11/26);TTF-1、Calponin、HER2和ALK全部病例均為陰性(0/26)。FISH

8、檢測(cè)12例PMEC發(fā)現(xiàn)MAML2基因重排(66.7％，12/18)。23例患者隨訪(fǎng)了7-170個(gè)月（中位隨訪(fǎng)32.6個(gè)月），5年和10年生存率為72.1％，與預(yù)后不良相關(guān)因素包括:年齡≥50歲，氣管周?chē)L(zhǎng)型，腫瘤直徑≥3cm，高級(jí)別腫瘤，Ki-67指數(shù)≥10％。手術(shù)完全切除是預(yù)后好的因素。9例DNA擴(kuò)增成功的PMEC三種方法均未檢測(cè)到7個(gè)基因中16個(gè)外顯子突變(0/9)。8例排除入組的病例均有類(lèi)似粘液表皮樣癌的結(jié)構(gòu)，免疫組化CK7、M

9、UC5AC、P63和TTF-1均陽(yáng)性(8/8)，5例ALK陽(yáng)性表達(dá)(5/8，62.5％)，F(xiàn)ISH檢測(cè)5例均發(fā)現(xiàn)ALK基因重排。
　　結(jié)論:
　　(1) PACC主要位于氣道，易于侵犯神經(jīng)且手術(shù)難于切除干凈，手術(shù)切除及術(shù)后放療有助于疾病治療減少?gòu)?fù)發(fā)。
　　(2) MYB蛋白在大多數(shù)PACC中陽(yáng)性表達(dá)，其陽(yáng)性表達(dá)可能與預(yù)后無(wú)關(guān)。MYB蛋白表達(dá)在ACC中有診斷及鑒別診斷價(jià)值，可以通過(guò)MYB免疫組化的方法幫助診斷，此外在少數(shù)

10、ACC病例中發(fā)現(xiàn)有MYB基因擴(kuò)增，不是導(dǎo)致MYB蛋白陽(yáng)性表達(dá)的主要因素。
　　(3) HPV感染可能不是PACC中P16蛋白陽(yáng)性表達(dá)的原因。
　　(4)位于氣道、出現(xiàn)粘液成分、缺乏角化及免疫組化P63、MUC5AC陽(yáng)性和TTF-1陰性有助于診斷PMEC。主要需要鑒別診斷的疾病為具有類(lèi)似粘液表皮樣癌結(jié)構(gòu)的肺癌，其本質(zhì)可能為具有粘液成分的腺鱗癌或腺癌，因ALK基因重排率高，建議在診斷工作中引起重視。
　　(5)大多數(shù)PME