纈沙坦聯(lián)合塞來昔布干預(yù)CCL4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化實驗研究.pdf

1、目的:觀察纈沙坦和塞來昔布對肝纖維化大鼠ALT、ALB、TBIL;TGF-β1、α-SMA和PVP的影響;探討RAAS和COX-2在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中的機制以及聯(lián)合抗纖維化的療效和應(yīng)用前景
　　方法:76只成年雄性SD大鼠，采用隨機數(shù)表按照隨機原則分為5組，A組16只，B、C、D、E組每組15只。A為正常對照組、B為肝纖維化模型組、C為纈沙坦組、D為塞來昔布組、E為纈沙坦+塞來昔布聯(lián)合組。A組3ml/Kg橄欖油皮下注射，其余4組均

2、給予50％CCL4和橄欖油混合液(V/ V=1∶1)3ml/Kg皮下注射誘導(dǎo)肝纖維化，每周3次，共12周。8周末每組隨機選擇處死1只大鼠，取肝臟組織行HE染色，明確肝纖維化是否形成。從第9周起，A、B組給予1 ml/100 g的生理鹽水灌胃，C、D、E組在建立肝纖維化模型的基礎(chǔ)上分別給予纈沙坦20mg/kg、塞來昔布10mg/kg、纈沙坦20mg/kg+塞來昔布10mg/kg，以上藥物均溶于生理鹽水中按1 ml/100g體重灌胃，1次/

3、d，至12周結(jié)束。實驗結(jié)束后，用八道生理記錄儀測定PVP;心臟采血測定血清ALT、ALB和TBIL;肝右葉組織經(jīng)HE染色確定肝纖維化分期，用ELISA法測定肝臟TGF-β1，用免疫組化法觀察肝臟α-SMA的表達，用計算機彩色圖像分析系統(tǒng)對α-SMA圖片陽性結(jié)果進行半定量分析。
　　結(jié)果:①門靜脈壓力（mmHg）:A、B、C、D、E組的平均值分別是5.52±0.68、15.85±1.10、10.27±0.71、11.10±0.94、

4、8.69±0.69。5組兩兩比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。②肝功能血清標志物檢測:ALT(U/L):A、B、C、D、E組的平均值分別為34.53±12.51、159.42±19.37、101.16±14.43、96.39±9.28、49.17±11.66。除C和D組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，其他兩兩比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); TBIL（μmol/L）:A、B、C、D、E組的平均值分別為1.42±0.2

5、1、3.51±0.95、2.85±0.72、3.05±0.34、2.41±0.65。除C和D組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，其他兩兩比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); ALB(g/L):A、B、C、D、E組的平均值分別為34.59±2.06、24.91±2.52、29.52±3.94、28.57±3.31、30.49±2.99。C、D、E組兩兩比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，其他兩兩比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.

6、05)。③肝組織TGF-β1表達結(jié)果:A組在匯管區(qū)和肝血竇間隙有TGF-β1陽性表達，為不規(guī)則棕黃色顆粒。B、C、D、E在肝纖維化區(qū)域和匯管區(qū)表達明顯增多，肝血竇間隙內(nèi)表達減少，部分肝細胞也表達TGF-β1。TGF-β1（μg/L）:A、B、C、D、E組的平均值分別是68.17±16.37、363.82±21.94、243.67±29.56、305.25±34.21、157.16±30.66。5組兩兩比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.0

7、5)。④α-SMA表達以及半定量分析:A組α-SMA在匯管區(qū)小動脈和小靜脈有極少量陽性表達。B、C、D、E組表達增強，主要位于肝纖維間隔區(qū)域、匯管區(qū)，為棕黃色橢圓形或長梭形顆粒。α-SMA(％):A、B、C、D、E組的平均值分別是0、35.24±2.82、20.46±3.94、22.65±3.46、12.43±2.15。除C和D組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，其他兩兩比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:①纈沙

8、坦和塞來昔布均可以降低肝纖維化大鼠門靜脈壓力改善肝臟血流動力學(xué)發(fā)揮抗纖維化作用，聯(lián)合使用效果要優(yōu)于單用。②纈沙坦和塞來昔布具有降低肝纖維化大鼠血清ALT、TBIL和升高ALB的作用，通過保護肝細胞發(fā)揮抗肝纖維化作用。聯(lián)合使用效果要優(yōu)于單用。③纈沙坦和塞來昔布均可以降低肝纖維化大鼠肝臟TGF-β1含量發(fā)揮抗纖維化作用，聯(lián)合使用效果要優(yōu)于單用。④纈沙坦和塞來昔布均可以降低肝纖維化大鼠肝臟α-SMA水平抑制HSC的活化發(fā)揮抗纖維化作用，聯(lián)合使