花生殼中木犀草素的分離提純及其抑菌性能研究.pdf

1、木犀草素(luteolin)是一種黃酮化合物，具有多種生物活性，在花生殼中有較高含量。本文以乙醇為提取劑從花生殼中提取木犀草素，優(yōu)化提取工藝，采用多種方法進(jìn)行分離純化，并研究了木犀草素初步純化物EP-1和精制物EP-2的抗菌活性。主要研究結(jié)果如下： 1．相同條件下三種提取方法木犀草素得率依次為：水浴浸提>微波提取>超聲波提取，即0.876％，0.801％，0.430％；水浴浸提所得干物中木犀草素含量為9.85％，微波提取干物中含

2、量為15.18％；確定最優(yōu)提取工藝為：微波功率900W，80％乙醇，提取時(shí)間70s，料液比1:20，提取率為82.66％。 2．高效液相色譜法峰面積比法，分析了不同純化物的純度和可能存在雜質(zhì)，乙酸乙酯萃取法使可檢出水溶性成份得到富集，水沉法可明顯降低乙醇液中水溶性成份含量，無(wú)水乙醇溶解干物質(zhì)使木犀草素和另一種脂溶性成分得到富集，薄層展開(kāi)系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)樣品的高度純化。 3．大孔樹(shù)脂純化法采用30％乙醇上樣-30％乙醇洗脫和7

3、0％乙醇上樣-70％乙醇洗脫所得產(chǎn)品純度較高；無(wú)水乙醇上樣法，樣品處理量較大，目標(biāo)物主要集中在70％乙醇洗脫部分；純化工藝確定為無(wú)水乙醇上樣，乙醇梯度沈脫，分段收集70％洗脫部分。 4．初步純化物(EP-1)對(duì)測(cè)試菌均有一定抑制或殺滅作用，具有廣譜的抑菌性能，對(duì)細(xì)菌的殺滅效果尤為明顯，對(duì)真菌的作用較差。在試驗(yàn)范圍內(nèi)EP-1的抑菌活性與濃度和時(shí)間成正相關(guān)，在相同的時(shí)間內(nèi)，提取液的濃度越高，抑菌率越高；在相同濃度的提取液，作用時(shí)間越

4、長(zhǎng)，抑菌率也就越高。 5．EP-2抗菌活性明顯高于EP-1，并凸顯出酚類物質(zhì)的抗菌特點(diǎn)。其抑菌活性強(qiáng)于同濃度的山梨酸和亞硝酸鈉，對(duì)枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌活性與山梨酸和亞硝酸鈉均無(wú)協(xié)同或拮抗作用；對(duì)啤酒酵母抑制作用與亞硝酸鈉有一定協(xié)同效果；培養(yǎng)溫度、pH對(duì)EP-2的抑菌效果有較大影響。 6．通過(guò)生物顯微鏡對(duì)藥液作用后的細(xì)菌形態(tài)進(jìn)行了表征，結(jié)果顯示：細(xì)菌的外膜及細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和功能被破壞，出現(xiàn)大量菌體碎片，阻止?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)向細(xì)胞