花生殼中木犀草素的分離純化及其化學(xué)合成.pdf

1、木犀草素是一種黃酮類(lèi)化合物,在花生殼中有較高的含量。它的藥理作用很廣泛,具有抗氧化、鎮(zhèn)咳、祛痰平喘、抗菌抗炎、增強(qiáng)免疫,和抗癌、抗腫瘤等多種生物活性。但是,由于木犀草素的提取率相當(dāng)?shù)?約萬(wàn)分之二左右),其在臨床上的研究受到限制,因此在天然產(chǎn)物提取的同時(shí),采用化學(xué)合成的方法制備木犀草素有著極其重要的意義。本文以花生殼為材料,從節(jié)約原材料、降低生產(chǎn)成本及提高產(chǎn)能等方面著手,研究木犀草素的提取純化工藝及其蘆丁半合成工藝。主要研究結(jié)果如下：(1

2、)確定了木犀草素的最佳提取工藝條件。分別采用單因素實(shí)驗(yàn)、正交設(shè)計(jì)法和均勻設(shè)計(jì)法對(duì)花生殼中的木犀草素提取條件進(jìn)行了探討。單因素實(shí)驗(yàn)確定了80℃為最佳浸提溫度,乙醇為提取溶劑；正交設(shè)計(jì)法優(yōu)化的提取條件為：80℃下,用65％乙醇為提取溶劑,料液比為1：25,提取2次,回流3 h/次,此時(shí)木犀草素的提取量為25.7mg.g-1；均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)化的提取條件為：80℃下,提取溶劑選擇60%乙醇,料液比為1：25,回流2h,浸提3次,此時(shí)結(jié)果最高,木犀

3、草素的提取量可達(dá)27.4 mg.g-1。結(jié)果表明均勻設(shè)計(jì)所得結(jié)果優(yōu)于正交設(shè)計(jì),并將其定為最佳提取工藝。(2)利用紅外光譜和紫外-可見(jiàn)分光光度法對(duì)木犀草素進(jìn)行了定性定量分析。從木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的紅外譜圖上可以看到木犀草素主要共有特征峰為：3423cm-1,1656 cm-1,1612 cm-1,1443 cm-1,1267 cm-1,1195 cm-1,1164 cm-1,1032 cm-1,862cm-1,839 cm-1,565c

4、m-1等,表明它們含有相同或相似的有效成分,可以此作為木犀草素定性分析的依據(jù)。利用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定木犀草素的吸光度,通過(guò)外標(biāo)法確定所得產(chǎn)品的含量。(3)以大孔吸附樹(shù)脂為載體,采用柱色譜法對(duì)木犀草素的純化工藝進(jìn)行了研究。篩選出了適合木犀草素純化的大孔吸附樹(shù)脂,對(duì)影響樹(shù)脂純化效果的重要因素進(jìn)行了細(xì)致考察。從4種不同的樹(shù)脂中,篩選出AB-8大孔樹(shù)脂為純化用樹(shù)脂,發(fā)現(xiàn)降低溫度、提高上樣液濃度和偏弱酸性上樣溶液(pH6時(shí)最佳)有利于提高吸

5、附量,高溫利于解吸；采用的解吸劑(70%乙醇)無(wú)毒,易回收,用4倍樹(shù)脂體積的洗脫劑洗脫,被吸附的木犀草素基本洗脫完全,該工藝穩(wěn)定性好,簡(jiǎn)便易行,適合于工業(yè)化大生產(chǎn)。(4)由于與木犀草素結(jié)構(gòu)相近的黃酮類(lèi)化合物很多,使得大孔吸附樹(shù)脂法對(duì)木犀草素的純化具有一定的局限性。本文對(duì)高純度木犀草素的制備進(jìn)行了初步的研究,確定了以乙酸乙酯作為萃取劑,加入硫酸銨作為鹽析劑的精制方法,用該法進(jìn)一步純化木犀草素,可以使產(chǎn)品中木犀草素的含量由58.2%提高到8

6、6.1%,重結(jié)晶后可達(dá)到92.3%。結(jié)果表明：乙酸乙酯萃取法對(duì)木犀草素的純化效果良好,回收率高,且操作簡(jiǎn)便,可用于實(shí)際生產(chǎn)中。(5)考察了兩種木犀草素半合成法的工藝。①蘆丁在堿性環(huán)境下,與Na2S204在微波加熱的條件下生成木犀草素；②橙皮苷先水解為橙皮素,然后脫甲基生成圣草酚,最后還原成木犀草素；通過(guò)紅外光譜和分光光度法的綜合分析,確定了產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)與含量。以實(shí)驗(yàn)的收率和產(chǎn)品中木犀草素的含量為指標(biāo),可看出蘆丁半合成法優(yōu)于橙皮苷半合成法,