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文檔簡介
1、本文考察了酸、酶、紫外輻射誘導對木豆葉中木犀草素、芹菜素含量的影響,并對超聲提取,大孔吸附樹脂分離,聚酰胺柱層析純化酶誘導后木豆葉中木犀草素、芹菜素的工藝條件進行了系統(tǒng)的研究。 1.確定了反相高效液相-二極管陣列檢測器方法同時測定木豆葉中木犀草素、芹菜素的條件: 色譜柱:HIQ SIL C18V柱(250 mm×4.6 mm I.D.),流動相:乙腈-水-乙酸(30:69.3:0.7,v/v/v),流速:1 mL/min
2、,檢測波長345 nm,進樣量10μL,柱溫30℃。 2.考察了酸誘導及酶誘導條件對木犀草素、芹菜素含量的影響,對影響含量的主要因素進行了研究,確定了最佳工藝參數(shù)。 酸誘導水解處理木豆葉的工藝參數(shù)為: 水解方式:雙向酸水解鹽酸濃度:0.5 mol/L水解時間:8 h水解溫度:90℃ 在上述優(yōu)化的條件下,酸誘導水解處理后木犀草素的含量為0.124 mg/g,芹菜素的含量為0.056 mg/g,分別比未經(jīng)酸誘
3、導水解處理提高61.1%和43.6%。 酶誘導處理木豆葉的工藝參數(shù)為: 酶種類:果膠酶酶濃度:0.4 mg/mL酶誘導時間: 36 h酶溶液pH值:3.5-4溫度: 30-35℃ 在上述優(yōu)化的條件下,酶誘導處理后木犀草素的含量為0.268 mg/g,芹菜素的含量為0.132 mg/g,分別比未經(jīng)酶誘導處理提高248.1%和238.5%。 3.確定了以酶誘導后木豆葉為原料,超聲提取木犀草素、芹菜素的工藝條件
4、: 提取溶劑:體積分數(shù)80%乙醇溶液液固比: 20:1提取次數(shù)及時間:3次,每次15 min,共45 min提取功率: 250 W在上述條件下,木犀草素、芹菜素的提取率分別為0.257 mg/g和0.126 mg/g,在浸膏中的含量分別為0.169%和0.083%。 4.應(yīng)用大孔吸附樹脂對木犀草素、芹菜素進行了分離,確定了AL-2大孔吸附樹脂分離木犀草素、芹菜素的最佳條件: 上樣濃度:木犀草素52.4 μg/mL
5、,芹菜素25.6 μg/mL上樣體積: 3 BV上樣流速: 15 BV/h上樣pH值: 5解吸溶液及體積:體積分數(shù)50%乙醇溶液2 BV及體積分數(shù)60%乙醇溶液2 BV解吸流速:1BV/h操作溫度: 25℃ 在上述優(yōu)化的條件下,經(jīng)過AL-2大孔吸附樹脂處理,木犀草素的含量從0.169%增加到2.55%,提高了15.1倍,芹菜素的含量從0.083%增加到0.76%,提高了9.2倍,回收率分別為78.54%和72.31%。
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