黃花蒿的抑菌活性及有效成分的初步分離研究.pdf

1、本項研究以黃花蒿為供試植物，采用不同的溶劑及提取方法對其進(jìn)行提?。挥貌煌纳餃y定方法測定了提取物對五種病原菌的生物活性，并對提取物中的活性組分進(jìn)行了追蹤及初步的分離。 1、不同方法提取黃花蒿浸膏 四種不同的提取方法提取黃花蒿的各種有機物質(zhì)，提取率由大到小分別為：微波輔助萃取法＞室溫攪拌提取法＞恒溫浸提法＞室溫浸提法；其中提取率最高的葉的水平行提取物的提取率分別為14.55％、11.84％、11.15％和10.19％。根

2、據(jù)實驗的成本和應(yīng)用前景，室溫攪拌提取法對提取物的提取經(jīng)濟有效。 2、黃花蒿提取率的比較 黃花蒿不同部位有機物質(zhì)的提取率，葉的最高，根次之，莖最低；不同溶劑提取結(jié)果表明，水提取物的提取率最高，石油醚I的提取率最低；不同方法提取結(jié)果表明，平行提取法優(yōu)于順序提取法；黃花蒿葉的水的平行提物的提取率為12.12％，順序提取物為10.19％；黃花蒿葉的石油醚I的平行提物的提取率為5.56％。丙酮溶劑的平行提取物中，葉的提取率為6.9

3、4％，莖的提取率為4.89％，根的提取率為9.63％。 3、黃花蒿對煙草及煙草青枯病菌的生物活性 黃花蒿的水提取物對煙草青枯病菌有一定的抑制作用，室內(nèi)生物測定結(jié)果表明，3 g/L的水提取物對煙草青枯病菌的抑菌圈直徑為1.5 cm(48 h)。不同濃度的黃花蒿水提物對煙草種子的萌發(fā)速度存在著不同程度的影響，對煙草幼苗根的生長也有不同的抑制作用，且隨著濃度的增大抑制作用加強，濃度大于1 g/L的溶液對根長度的抑制作用一直保持

4、在45％以上。田間實驗結(jié)果表明，黃花蒿莖葉的粉碎物對煙草青枯病有一定的防治效果，但防效并不高；黃花蒿提取青蒿素之后的殘渣對煙草青枯病幾乎沒有效果。 4、黃花蒿對四種病原真菌的生物活性 室內(nèi)生物測定結(jié)果表明，黃花蒿浸提物對玉米小斑病菌及小麥紋枯病菌具有良好的抑制作用，對煙草赤星病菌及棉花枯萎病菌的抑制效果相對較差：黃花蒿葉的丙酮提取物對玉米小斑病菌的菌絲生長抑制率為83.67％，對小麥紋枯病菌的抑制率為89.55％，抑制中

5、濃度分別為0.2056 g/L，0.1828 g/L；葉的提取物的抑菌效果優(yōu)于莖的提取物，根的效果最差；平行提取物的抑菌率高于順序提取物：各種溶劑提取的黃花蒿提取物對同一種菌的抑制作用差別較大，其中丙酮提取物的生物活性最好。 5黃花蒿浸提物的抑菌活性物質(zhì)的追蹤分離采用硅膠柱層析法對黃花蒿葉的丙酮平行提取物進(jìn)行活性追蹤分離，以石油醚(60-90℃)：丙酮(13：1，11：1，9：1，7：1，5：1，3：1，1：1，1：2，1：3)洗脫，控

6、制洗脫劑流速在300mL/h，每40min收集一份，共分離得到48組分。以石油醚(60-90℃)：丙酮=3：1(v/v)作為薄層層析的展開劑，點樣；合并活性大小相似的組分，共得到20個組分。進(jìn)一步活性追蹤結(jié)果表明，F(xiàn)3組分的活性最好。 系統(tǒng)生測的結(jié)果表明：3g/L的F3組分對玉米小斑病菌及小麥紋枯病菌菌絲生長的抑制率分別是90.45％，100％；F3對玉米小斑病菌的菌絲生長的EC50值為0.0824g/L，對小麥紋枯病菌抑制菌絲

7、生長的毒力相對較強，其EC50值為0.02230 g/L。 對F3進(jìn)一步分離，得到三種活性物質(zhì)，物質(zhì)Ⅰ，物質(zhì)II和物質(zhì)Ⅲ，采用濾紙片法對三種病原進(jìn)行測試：物質(zhì)Ⅱ的1 g/L的溶液對玉米小斑病菌和小麥紋枯病菌均有很好的抑制效果，抑菌圈直徑直徑分別為4.0鋤和4.61Acm，說明物質(zhì)Ⅱ是活性物質(zhì)，而且主要表現(xiàn)在對病原真菌的菌絲具有抑制效果?；钚晕镔|(zhì)Ⅱ?qū)τ衩仔“卟【咦拥拿劝l(fā)具有一定抑制作用，濃度越高，對孢子萌發(fā)的抑制作用越大。濃度為