黃瓜菌核病拮抗細菌的分離、鑒定及抑菌活性初步研究.pdf

1、本文旨在從日光溫室蔬菜根際土壤中分離篩選對黃瓜菌核病等植物土傳病害致病菌具有良好拮抗活性的生防細菌，考察其用于植物病害防治的潛力，并對其抑菌活性物質(zhì)進行初步探討。 利用平板稀釋法和點接法相結(jié)合，對采自山東泰安、日照、淄博、濟南、德州、聊城、壽光、濰坊、諸城等9個地市黃瓜日光溫室的土壤樣品進行拮抗細菌的分離和篩選，共獲得21株對黃瓜菌核病菌具有拮抗活性的細菌，其分布率與田間發(fā)病率呈正相關(guān)。平板對峙法復(fù)篩發(fā)現(xiàn)，其中有4株細菌對黃瓜菌

2、核病菌具有強拮抗作用，以．BSH-4抑制率最高為91.1％，抑菌帶寬為18.5mm，繼代培養(yǎng)10代的培養(yǎng)物抑菌率達到88.5％。各菌株在抑制病原菌菌絲生長時，均與病原菌之間形成明顯的抑菌寬帶，說明該拮抗菌對黃瓜菌核病菌的抑制機理主要為抗生物質(zhì)的產(chǎn)生。 顯微觀察結(jié)果表明，4株生防細菌對黃瓜菌核病菌菌絲微觀結(jié)構(gòu)影響各不相同。其中，BMP-11處理使黃瓜菌核病菌菌絲變得粗大、彎曲，形成分隔，菌絲體內(nèi)原生質(zhì)聚集成塊；BL02處理則使菌絲

3、體變粗，體壁溶解，壁內(nèi)原生質(zhì)聚集、外溢，菌絲體逐漸變得稀薄透明；BSH-4處理病原菌菌絲扭曲變粗，菌絲體內(nèi)原生質(zhì)褐化、聚集，但無外溢現(xiàn)象；ZB13處理對菌核病菌菌絲的微觀影響相對較弱，除菌絲變細、分枝增多外，無其他明顯變化。 抑菌譜測定結(jié)果表明，4株拮抗細菌均具有廣譜抑菌活性，其中BMP-11抑菌活性最高，對黃瓜猝倒病菌、蔓枯病菌、枯萎病菌、立枯病菌、番茄早疫病菌、辣椒疫病病菌、茄子綿疫病菌等7種病菌均具有強烈抑制作用，對除黃瓜

4、猝倒病菌和辣椒疫病病菌以外的其他5種病菌的抑菌帶寬度均在15mm以上，其次是BL02和BSH-4，對番茄早疫病菌的抑菌帶寬度也在15mm以上，ZB13對7種病原菌也均有不同程度的抑制作用，但活性相對較弱。 采用生理生化特性分析和16SrDNA序列分析兩種方法對4株生防菌進行鑒定。結(jié)果表明：BMP-11菌屬于多粘類芽孢桿菌(Paenibacilluspolymyxa)、BL02菌屬于枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis

5、)、BSH-4和ZB13菌等同屬于短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)。 通過種子處理、離體葉片接種、溫室盆栽試驗和田間防效試驗，以及常用殺菌劑對生防菌的抑制試驗，初步研究了各生防菌的最佳應(yīng)用途徑及使用方法。結(jié)果表明上述拮抗菌株兼具防治植物病害和促進植物生長的潛能。利用發(fā)酵液混以載體涂抹在植物病部防治菌核病效果較佳。由于一般常用殺菌劑在田間用量下對各生防菌基本無影響，可以將生物菌劑與化學(xué)藥劑同時使用，以取得更好的防治