蜜環(huán)菌發(fā)酵產(chǎn)物有效成分的分離鑒定與活性研究.pdf

1、蜜環(huán)菌是一種兼性寄生于多種木本、草本植物的野生藥食兩用真菌，研究發(fā)現(xiàn)，其具有中樞鎮(zhèn)靜、改善睡眠、增強(qiáng)免疫和神經(jīng)調(diào)節(jié)等重要的營養(yǎng)價(jià)值和藥理作用，相關(guān)產(chǎn)品制劑是治療頭痛、眩暈、神經(jīng)衰弱等疾病的有效藥物，蜜環(huán)菌發(fā)酵產(chǎn)物中富含核苷類化合物、必需氨基酸、多肽、多糖和倍半萜類化合物等多種天然活性物質(zhì)，分離鑒定活性物質(zhì)的組成和開展質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究，具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。
　　 本研究分析檢測(cè)了蜜環(huán)菌發(fā)酵產(chǎn)物中的活性成分多糖、核苷物質(zhì)和多

2、肽，并利用液相色譜、氣相色譜和紅外光譜等方法進(jìn)一步對(duì)提取到的多糖和核苷物質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定與研究，同時(shí)考察了蜜環(huán)菌多糖的抗氧化活性和不同溶劑提取物的抗菌活性。主要的研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　 1．改變蜜環(huán)菌發(fā)酵的不同種類碳氮源，測(cè)定多糖含量和菌體干重，篩選出產(chǎn)蜜環(huán)菌多糖和菌絲體生長(zhǎng)的最適碳氮源，得出紅薯粉和豆粕的組合最適合產(chǎn)多糖，玉米漿和玉米粉的組合菌絲體得率最高。利用紫外、紅外光譜和氣相衍生化法分析了提取到水溶性多糖的基本結(jié)

3、構(gòu)信息，其結(jié)構(gòu)由吡喃葡萄糖單一組成。
　　 2．通過與抗壞血酸、TBHQ的對(duì)比，對(duì)蜜環(huán)菌水溶性多糖清除羥基自由基、超氧陰離子和DPPH自由基的能力進(jìn)行了系統(tǒng)研究。結(jié)果表明在清除率達(dá)到50 ％時(shí)，多糖對(duì)·OH、·O2－和DPPH自由基的清除濃度大約為1.5 mg·mL-1、3.5 mg·mL-1和0.5 mg·mL-1。三種不同的體外自由基清除體系證明了蜜環(huán)菌水溶性多糖具有較強(qiáng)的抗氧化活性。
　　 3．經(jīng)硅膠柱層析分離到一

4、種核苷類物質(zhì)，紫外和紅外光譜顯示其基本結(jié)構(gòu)信息，HPLC結(jié)果表明其為單一組分，而且與蜜環(huán)菌菌粉核苷色譜圖中的一種物質(zhì)相對(duì)應(yīng)。HPLC也分析了4批不同蜜環(huán)菌菌粉中所含有的核苷化合物，初步證實(shí)發(fā)酵產(chǎn)物中含有7～9種核苷類物質(zhì)。
　　 4．蜜環(huán)菌菌粉分別用70 ％乙醇、水和石油醚進(jìn)行索氏提取，對(duì)提取物開展抑菌活性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，醇提物抑制效果最好，對(duì)2種酵母菌和8種細(xì)菌均有抑菌作用，其中對(duì)白假絲酵母和葡萄假絲酵母抑菌活性最強(qiáng)。水提