胰島素對心肌梗死后心臟炎癥反應(yīng)的影響及其心臟保護作用研究.pdf

1、研究背景:
　　心力衰竭是嚴重威脅人類健康的重大疾病,心肌梗死是心力衰竭發(fā)生的最主要原因,如何減少心肌梗死后缺血心肌的凋亡,保護梗死區(qū)周圍正常和缺血心肌,延緩心室重構(gòu),改善心臟功能是目前心血管疾病研究的重大課題。
　　動物實驗和臨床資料顯示,心肌梗死后發(fā)生的炎癥反應(yīng)是誘導(dǎo)心肌凋亡、心肌纖維化,促進心室重構(gòu)發(fā)生的主要原因。因此,利用藥物有效的控制心肌梗死后的炎癥反應(yīng),抑制炎性細胞因子對心肌的損害,可能是治療心肌梗死后心室重構(gòu)和

2、心功能障礙的有效措施。
　　本課題組近年的研究表明,胰島素可激活PI3k-Akt-eNOS信號通路,促進血管內(nèi)皮細胞NO的表達,減少缺血再灌注心肌TNF-α的產(chǎn)生,減輕心肌缺血性損傷。但是胰島素能否進一步調(diào)節(jié)心肌梗死后的炎癥反應(yīng),以及胰島素的這一作用是否有助于延緩心室重構(gòu)改善心臟功能?本研究將進一步觀察胰島素在心肌梗死后的作用,探討胰島素的炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)作用與心臟保護作用之間的關(guān)系。
　　研究目的:
　　1.觀察胰島素對

3、大鼠心肌梗死(MI)后炎癥反應(yīng)的影響。
　　2.探討胰島素調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的作用是否有助于延緩心室重構(gòu)和改善心臟功能。
　　實驗方法:
　　1.動物實驗及分組:成年雄性Sprague-Dawley大鼠80只,體重范圍180-220g,結(jié)扎冠狀動脈左前降支建立大鼠心肌梗死模型。隨機分為5組:(1)假手術(shù)組(Sham)(n=20);(2)生理鹽水對照組(Saline)(n=20);(3)胰島素治療組(MI+Ins)(n=20)

4、:冠狀動脈結(jié)扎15min后給予胰島素尾靜脈滴注(50U/L,4ml/kg?h)2.5h,術(shù)后1周內(nèi)每天皮下注射胰島素(0.5U/ml,1ml/kg?d);(4)Etanercept治療組(MI+En)(n=20):術(shù)前2d及術(shù)后第1,4,7天給予Etanercept皮下注射(1mg/ml,1ml/kg);(5)胰島素聯(lián)合Etanercept治療組(MI+En+Ins)(n=20):術(shù)前2d及術(shù)后第1,4,7天給予Etanercept皮下

5、注射(1mg/ml,1ml/kg),在冠狀動脈結(jié)扎15min后,給予胰島素尾靜脈滴注(50U/L,1ml/kg?h)2.5h,術(shù)后1周內(nèi)每天給予胰島素皮下注射(0.5U/ml,1ml/kg?d)。
　　2.在術(shù)前和術(shù)后第1、4周進行超聲檢測,測定其左心室收縮末內(nèi)徑(LVESD)、左心室舒張末內(nèi)徑(LVEDD)、射血分數(shù)數(shù)(EF)和縮短分數(shù)(FS)。在術(shù)前及術(shù)后第1、4周進行血流動力學(xué)檢測,測定平均動脈壓(MABP)左室進展壓(LV

6、DP)以及左室最大收縮/舒張末壓微分(±LVdp/dtmax)。
　　3.心臟取材稱重(HW),計算心重體重比(HW/BW)。然后進行TTC-依文斯蘭染色,切片后測算梗死心肌長度和左心室周長,計算心肌梗死面積。
　　4.收集大鼠動脈血液和心肌組織,低速離心提取血清,雙夾心ELISA法檢測血清TNF-α含量。提取心肌組織蛋白,BSA定量后用雙夾心ELISA法檢測心肌組織TNF-α含量。
　　實驗結(jié)果:
　　1.在心

7、肌梗死后第1和4周,與假手術(shù)組相比,對照組大鼠心肌TNF-α含量明顯增高(P<0.01),與對照組相比,胰島素治療組心肌TNF-α含量明顯降低(P<0.01,1w,vs.Saline,P<0.05,4w,vs.Saline)。在心肌梗死后1周和4周,Etanercept治療組和胰島素治療組大鼠心肌TNF-α無明顯差異,胰島素聯(lián)合Etanercept治療和單純胰島素治療相比TNF-α無明顯差異。
　　2.在心肌梗死后第1周和第4周,

8、與假手術(shù)組相比對照組大鼠LVESD、LVEDD均明顯增加(P<0.05),EF和FS明顯下降(P<0.01),與對照組相比,胰島素治療組大鼠LVESD減少(P<0.05),EF和FS明顯增加(P<0.05)。
　　給予Etanercept治療后,在心肌梗死后第4周,與Etanercept治療組相比,胰島素治療(MI+Ins組和MI+En+Ins組)可以減少LVESD(P<0.05),增加大鼠EF和FS(P<0.05)。
　　

9、3.在心肌梗死后第1和第4周,與假手術(shù)組相比,對照組大鼠LVDP明顯下降(P<0.01);±LVdp/dtmax明顯下降(1w,P<0.05,4w,P<0.01);與對照組相比胰島素治療組大鼠LVDP和±LVdp/dtmax明顯增高(P<0.05)。在術(shù)后第1和第4周,與Etanercept治療組相比,胰島素治療(MI+Ins組和MI+En+Ins組)可以增加LVDP和±LVdp/dtmax(P<0.05)。
　　4.在心肌梗死后

10、4周,與假手術(shù)組相比,對照組和胰島素治療組HW/BW均明顯增大(P<0.01),而胰島素治療組和對照組相比則無明顯差異。與對照組和Etanercept治療組相比,胰島素治療組心肌梗死面積明顯降低。
　　結(jié)論:
　　1.胰島素治療可以抑制心肌梗死后第1周和第4周TNF-α的產(chǎn)生,胰島素聯(lián)合Etanercept治療不能增強單純胰島素治療的抑制TNF-α產(chǎn)生的作用。
　　2.胰島素治療可以減少心肌梗死面積,延緩心肌梗死后的心