載脂蛋白M及E-選擇素基因多態(tài)性與中國漢族人群缺血性卒中的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：腦血管病(cerebrovascular disease,CVD)是目前世界范圍內(nèi)第二位常見的致死原因,也是發(fā)達(dá)國家長期致殘的主要原因,嚴(yán)重危害著人類的健康和生存質(zhì)量。其中缺血性中風(fēng)(Ischemic stroke,IS)約占全部CAD的70％。除了傳統(tǒng)的危險因素如高血壓、糖尿病、血脂異常、吸煙、飲酒、肥胖等與腦卒中的發(fā)生有關(guān)外,許多學(xué)者已經(jīng)從不同的角度證實(shí)了IS是一種由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的復(fù)雜性疾病,并且遺傳因素在其發(fā)病

2、機(jī)制中起著尤為重要的作用。因此篩選出對IS具有遺傳易感性的個體,并進(jìn)行個體化的預(yù)防和治療,有望降低IS的發(fā)病率、致死率和致殘率,從而提高人類的健康水平。而篩選易感基因的主要方法是對候選基因的關(guān)聯(lián)研究。
　　 動脈粥樣硬化的形成是IS的重要病理基礎(chǔ)。目前的研究已經(jīng)證實(shí),動脈粥樣硬化是多因素影響下的復(fù)雜病理過程,其中脂代謝紊亂及炎癥反應(yīng)均與動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。因此,本研究著眼于中國北方漢族人群,選擇了載脂蛋白M(Apo

3、M)和E-選擇素(E-selectin)基因作為候選基因,采用病例-對照研究的方法,比較ApoM基因的多態(tài)性位點(diǎn)rs805297、rs805296、m9404941及E-selectin基因的多態(tài)性位點(diǎn)rs5355、rs5361、rs1805193的基因型、等位基因型在病例組和對照組中的頻率分布差異,進(jìn)而探討這兩種基因多態(tài)性與中國北方漢族人群IS之間的關(guān)聯(lián),以期為探尋該病的易患基因提供一定的分子遺傳學(xué)方面的證據(jù)。
　　 方法：采

4、用病例-對照研究,病例組按病因不同分為大動脈粥樣硬化型IS組和腔隙性腦梗死組。大動脈粥樣硬化型IS組選取中國北方漢族人群中的大動脈粥樣硬化型IS患者314例,其中男181例,女133例,年齡在49—82歲之間,平均年齡64.43±8.48歲,彼此無親緣關(guān)系。腔隙性腦梗死組選取中國北方漢族腔隙性腦梗死患者131例,其中男69例,女62例,年齡在50—78歲之間,平均年齡64.65±8.05歲,彼此無親緣關(guān)系。選擇性別、年齡與病例組相匹配的

5、健康個體389例作為對照組,其中男215例,女174例,年齡在50—79歲之間,平均年齡63.93±6.86歲,彼此無親緣關(guān)系。應(yīng)用多重單堿基延伸SNP分型技術(shù)(Multipies SNaPshot)進(jìn)行病例組和對照組中目的基因多態(tài)性的檢測。應(yīng)用擬合優(yōu)度x2檢驗(yàn)來驗(yàn)證每個SNP位點(diǎn)基因型在抽樣群體中的分布是否符合Hardy-Weinberg平衡。對于連續(xù)性變量,以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用單因素方差分析進(jìn)行檢驗(yàn)。對于單個SNP位點(diǎn)的數(shù)據(jù),通

6、過SPSS13.0統(tǒng)計軟件,以x2 Fisher's精確概率檢驗(yàn)其基因型、等位基因型在病例組與對照組中的頻率分布差異。然后再結(jié)合臨床資料,對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行Logistic回歸分析,以排除傳統(tǒng)混雜因素的干擾,P＜0.05為具有統(tǒng)計學(xué)差異。ApoM與E-selectin基因?qū)S的影響以比值比(Odds Ratio,OR)和95％可信區(qū)間(95％Confidence Interval,95％CI)來評估。應(yīng)用SHEsis在線單倍型分析軟件計算

7、ApoM與E-selectin基因病例組和對照組單體型的頻率分布差異,P＜0.05表示具有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 結(jié)果：
　　 1、病例組和對照組中ApoM與E-selectin基因的每個多態(tài)性位點(diǎn)基因型H-W平衡檢驗(yàn)結(jié)果顯示它們的基因型頻率分布未偏離Hardy-Weinberg平衡(p＞0.05)。這表明本課題所選取的研究人群基因遺傳平衡,數(shù)據(jù)來自同一孟德爾群體,適合做遺傳學(xué)分析。
　　 2、大動脈粥樣硬化型腦梗死

8、組ApoM基因rs805296位點(diǎn)的TC基因型及C等位基因型頻率分布明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001,OR=1.85,95％CI:1.29-2.65:P＜0.001,OR:1.78,95％CI:1.29-2.45)。應(yīng)用條件logistic回歸校正傳統(tǒng)危險因素后,rs805296位點(diǎn)TC基因型頻率分布大血管組仍高于對照組,差異仍有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.023,OR=1.714,95％CI:1.076-2.732)。

9、　　 3、大動脈粥樣硬化型腦梗死組ApoM基因rs805297位點(diǎn)基因型頻率分布與對照組未見有顯著差異。但其A等位基因型頻率顯著高于對照組(P=0.002,OR=1.38,95％CI:1.10-1.72)。
　　 4、大動脈粥樣硬化型腦梗死組ApoM基因rs9404941位點(diǎn)的基因型、等位基因型頻率分布與對照組間未見有顯著性差異。
　　 5、在大動脈粥樣硬化型腦梗死組和對照組中,ApoM基因rs805296、rs805

10、297及rs9404941組建的單體型頻率分布在病例組和對照組中無顯著性差異。
　　 6、大動脈粥樣硬化型腦梗死組與對照組ApoM基因rs805296位點(diǎn)多態(tài)性與血脂的相關(guān)性分析結(jié)果顯示:在病例組,ApoM基因rs805296位點(diǎn)各基因型攜帶者的血甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇的水平均無明顯差異。在對照組中,攜帶CC基因型的個體較攜帶RR及TC基因型的個體血總膽固醇水平更高(P=0.019),其余指標(biāo)

11、未見明顯差異。在病例組與對照組兩組個體間,各基因型攜帶者的各項(xiàng)血脂指標(biāo)均未見明顯差異。
　　 7、在腔隙性腦梗死組ApoM基因rs9404941、rs805296及rs805297各位點(diǎn)基因型及等位基因型頻率分布和對照組未見有顯著差異。
　　 8、大動脈粥樣硬化型腦梗死組E-selectin基因rs1805193及rs5355各位點(diǎn)基因型及等位基因型頻率分布和對照組未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 9、大動脈粥樣硬化型

12、腦梗死組E-selectin基因rs5361位點(diǎn)的AC基因型及C等位基因型頻率分布明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001,OR=2.76,95％CI:1.54-4.96；P＜0.001,OR=2.80,95％CI:1.58-4.94)。應(yīng)用條件logistic回歸分析校正后,rs5361AC基因型頻率分布病例組仍高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.010,OR=2.665,95％CI:1.265-5.613)。
　　

13、 10、由E-selectin基因rs5355、rs5361構(gòu)建的單體型頻率分布:CC單體型在大動脈粥樣硬化型腦梗死組中的頻率分布高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001,OR=2.92,95％CI:1.64-5.22)。
　　 11、E-selectin基因rs5355、rs5361及rs1805193各位點(diǎn)基因型及等位基因型頻率分布在腔隙性腦梗死組和對照組中未見有顯著差異。
　　 結(jié)論：
　　 1、Apo

14、M基因rs805296位點(diǎn)的TC基因型及C等位基因型可能與中國北方漢族人群大動脈粥樣硬化型IS具有相關(guān)性。
　　 2、ApoM基因rs805297位點(diǎn)的A等位基因型可能是中國北方漢族人群大動脈粥樣硬化型IS的獨(dú)立的危險因素。
　　 3、ApoM基因rs9404941位點(diǎn)的基因多態(tài)性可能與中國北方漢族人群大動脈粥樣硬化型IS之間無顯著的相關(guān)性。
　　 4、未發(fā)現(xiàn)由ApoM基因rs9404941、rs805297、r

15、s805296位點(diǎn)構(gòu)建的危險性或保護(hù)性單體型。
　　 5、ApoM基因rs805296、rs805297、rs9404941位點(diǎn)的基因多態(tài)性可能與中國北方漢族人群腔隙性腦梗死之間無相關(guān)性。
　　 6、E-selectin基因rs5361位點(diǎn)的AC基因型及C等位基因型可能與中國北方漢族人群大動脈粥樣硬化型IS具有相關(guān)性。
　　 7、E-selectin基因rs5355、rs1805193位點(diǎn)的多態(tài)性與中國北方漢族人