低劑量環(huán)磷酰胺治療尖銳濕疣的療效及其機(jī)制和安全性的初步探討.pdf

1、本文主要分兩部分展開(kāi)研究：
　　第一部分 低劑量環(huán)磷酰胺治療尖銳濕疣患者療效研究
　　目的：探討低劑量環(huán)磷酰胺治療尖銳濕疣的療效。
　　方法：選取86名患有較大尖銳濕疣的患者，常規(guī)激光治療消除皮損。然后隨機(jī)將這些患者分為三組。第一組52人，為低劑量環(huán)磷酰胺治療組，接受50mg環(huán)磷酰胺口服治療，每天一次，持續(xù)一周。另一組26人，為安慰劑組，使用安慰劑治療。第三組8人，為高劑量環(huán)磷酰胺治療組，這組患者在激光治療后給予高劑量

2、環(huán)磷酰胺（200mg每天，服用一周）治療。之后對(duì)這些患者進(jìn)行定期隨訪，觀察患者的復(fù)發(fā)情況。
　　結(jié)果：低劑量環(huán)磷酰胺治療組中，在最初的6周內(nèi)無(wú)任何人復(fù)發(fā)，而后出現(xiàn)的9例復(fù)發(fā)患者經(jīng)過(guò)再一次為期一周的單純低劑量環(huán)磷酰胺的治療后，7人完全康復(fù)并且沒(méi)有出現(xiàn)再次復(fù)發(fā)。在安慰劑組中，最遲八周以內(nèi)，有21例患者復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率達(dá)81％。高劑量環(huán)磷酰胺治療組中的患者使用激光和高劑量環(huán)磷酰胺治療后，8周內(nèi)有6人復(fù)發(fā)。
　　結(jié)論：通過(guò)經(jīng)常規(guī)激光治療

3、后口服低劑量環(huán)磷酰胺的方法來(lái)治療較大尖銳濕疣的患者能取得良好的療效，即用低劑量環(huán)磷酰胺能有效阻止較大尖銳濕疣患者激光治療后的復(fù)發(fā)。
　　第二部分 低劑量環(huán)磷酰胺治療尖銳濕疣患者的機(jī)制及安全性初步探討
　　目的：1、探討低劑量環(huán)磷酰胺治療尖銳濕疣患者的免疫機(jī)制；2、探討低劑量環(huán)磷酰胺治療尖銳濕疣患者的安全性。
　　方法：1、選取低劑量組、高劑量組及安慰劑組患者各8例，健康志愿者6例，分別抽取外周血檢測(cè)其Treg細(xì)胞及總T

4、細(xì)胞和NK細(xì)胞的數(shù)量。2、選取低劑量組、安慰劑組患者各6例，抽取外周血檢測(cè)患者T細(xì)胞增殖情況、HPV特異性T細(xì)胞增殖情況及細(xì)胞特異性殺傷情況；檢測(cè)NK細(xì)胞經(jīng)IL-2和IL-12刺激后產(chǎn)生IFN-γ的水平即NK細(xì)胞活性及經(jīng)IL-2刺激后作為效應(yīng)細(xì)胞其對(duì)K562細(xì)胞和HPV感染細(xì)胞的細(xì)胞毒性分析。3、選取36名HPV-6型感染的較大生殖器疣患者。激光治療后用小刮匙小心刮取治療區(qū)域周?chē)纳掀そM織。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)HPV-DNA含量

5、。然后隨機(jī)將上述激光治療組患者分為兩組，24名患者接受低劑量環(huán)磷酰胺治療，12名患者接受安慰劑治療7天。14天后，在相同區(qū)域取樣測(cè)量HPV-DNA含量。4、激光治療后分別用低劑量環(huán)磷酰胺（n=18）和安慰劑（n=14）治療7天。三周后收集外周血樣本。測(cè)定血清中抗ds-DNA抗體、類(lèi)風(fēng)濕因子（包括抗IgM,IgG和IgA的自身抗體）的水平，同時(shí)檢測(cè)患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶和肌酐水平。
　　結(jié)果：1、激光治療后尖銳濕疣患者體內(nèi)的CD3+CD4+

6、FOXP3+Treg細(xì)胞的數(shù)量與健康受試者相當(dāng)；與對(duì)照組相比，經(jīng)過(guò)低劑量環(huán)磷酰胺治療后患者體內(nèi)的Treg細(xì)胞數(shù)量在百分比和絕對(duì)數(shù)兩項(xiàng)中都顯著下降；高劑量環(huán)磷酰胺組體內(nèi)的Treg細(xì)胞數(shù)量亦明顯下降。低劑量環(huán)磷酰胺組與對(duì)照組外周血中的CD3+T淋巴細(xì)胞和CD3-CD56+NK細(xì)胞的總量無(wú)明顯差異；而高劑量環(huán)磷酰胺組外周血中的CD3+T淋巴細(xì)胞和CD3-CD56+NK細(xì)胞的總量較對(duì)照組明顯下降。2、經(jīng)抗CD3和CD28抗體刺激后低劑量環(huán)磷酰胺

7、治療組外周血T細(xì)胞增殖比對(duì)照組活躍；低劑量環(huán)磷酰胺治療組中HPV特異性T細(xì)胞增殖活性和細(xì)胞毒性比對(duì)照組均增強(qiáng)。相對(duì)于對(duì)照組而言，低環(huán)磷酰胺治療組患者外周血NK細(xì)胞受IL-2和IL-12刺激后產(chǎn)生了更多的IFN-γ；低劑量環(huán)磷酰胺治療組患者外周血NK細(xì)胞經(jīng)IL-2預(yù)刺激后對(duì)NK細(xì)胞敏感的K562細(xì)胞和HPV感染細(xì)胞的細(xì)胞溶解作用較對(duì)照組增強(qiáng)。3、經(jīng)激光治療后，36個(gè)患者的激光治療區(qū)域周?chē)谋砥ぶ胁《綝NA的含量相近。但是經(jīng)過(guò)14天的低劑量

8、環(huán)磷酰胺治療（n=24）和安慰劑治療（n=12）后，僅在安慰劑治療組中發(fā)現(xiàn)了大量的病毒復(fù)制，而在21個(gè)環(huán)磷酰胺治療患者中幾乎檢測(cè)不到HPV-DNA，其他3個(gè)治療患者中也僅檢測(cè)出少量的HPV-DNA。4、低劑量環(huán)磷酰胺治療3周后患者的血清中抗dsDNA水平、類(lèi)風(fēng)濕因子的3個(gè)子類(lèi)（包括IgM,IgG和IgA）的自身抗體的含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶和肌酐水平與安慰劑組相比并沒(méi)有增高。
　　結(jié)論：低劑量環(huán)磷酰能選擇性消減患者體內(nèi)有免疫抑制作用的Tr