鈣池操縱性鈣內(nèi)流在人肺腺癌A549細胞中的研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學2008級博士學位論文鈣池操縱性鈣內(nèi)流在人肺腺癌A549細胞中的研究TherolesofSCOEinhumanlungadenocarcinomaA549cell課題來源：鈣池操縱性鈣內(nèi)流在非小細胞肺癌中的功能研究國家自然科學基金面上項目(8107917)專業(yè)名稱學位申請人指導教師答辯委員會主席答辯委員會成員胸心外科楊海虹王武軍教授何建行教授戎鐵華教授劉啟才教授羅春生教授黃穗喬教授陳漢章教授曾慶思教授殷偉強教授論文評閱人楊運

2、有教授蔡開燦教授張必良教授2012年5月21日廣州摘要上皮細胞，它們在腫瘤細胞中也陸續(xù)有相關的研究報道出現(xiàn)。NSCLC多來源于支氣管上皮細胞，因此我們選擇入肺腺癌細胞A549，研究SOCE在肺癌細胞中的表達情況；研究STIMI／ORAll介導的SOCE對肺癌細胞的生物學行為如增殖、遷移和侵襲功能的影響；研究NSCLC患者手術腫瘤組織中STIMl或ORAll表達和生存預后的關系。研究目的首先研究人NSCLC腫瘤組織中的SOCC通道STIM

3、l和ORAH的mRNA表達情況；其次在人肺腺癌細胞系A549中，研究SOCE與細胞增殖、遷移和侵襲的關系；然后研究STIMl和ORAll蛋白在A549細胞增殖、遷移和侵襲功能中的作用；最后研究NSCLC患者手術腫瘤組織中STIMl或ORAll蛋白表達和生存預后的關系。研究方法1、我們共收集20072009年NSCLC術后腫瘤組織和配對遠癌正常肺組織(距腫瘤5cm)24例，標本來自于廣州醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院呼吸疾病研究所胸心外科。所有患者術

4、前未行放化療和其他抗腫瘤治療。采用Trizol法提取組織總RNA，逆轉錄成cDNA，熒光定量PCR方法檢測組織STIMl和ORAHmRNA表達。2、人肺腺癌A549細胞，人支氣管上皮細胞16HBE購自中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫。細胞增殖實驗中，A549細胞和16HBE細胞中分別加入SOCE抑制劑SKF96365或NiCl2。應用羅氏公司W(wǎng)ST1細胞增殖檢測試劑盒檢測24、48、72h的OD值，細胞增殖抑制率=1實驗組OD值／正