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1、目的:本實(shí)驗(yàn)采取WISTAR大鼠眼眶內(nèi)視神經(jīng)部分性?shī)A挫傷模型檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)其視網(wǎng)膜中腫瘤抑制基因PTEN編碼的蛋白和磷酸化的PTEN蛋白(P-PTEN)的表達(dá)變化,從而探討PTEN和P-PTEN蛋白在視神經(jīng)損傷后調(diào)控節(jié)細(xì)胞凋亡和存活以及它們?cè)谟绊懸暽窠?jīng)軸突再生方面的作用機(jī)制。 方法:成年健康WISTAR大鼠54只,其中48只均用40克夾持力的視神經(jīng)夾行右側(cè)視神經(jīng)眼眶內(nèi)行夾挫傷手術(shù)而制成創(chuàng)傷性視神經(jīng)部分性損傷模型,左側(cè)為正常對(duì)照,
2、另外6只做右側(cè)假手術(shù),只顯露右側(cè)視神經(jīng)而不做夾挫傷操作,術(shù)后第七天處死。動(dòng)物模型在施行視神經(jīng)夾挫傷術(shù)后分別存活6小時(shí)(h),1天(d),3天,5天,7天,9天,14天,28天后處死,每組6只。用免疫組織化學(xué)方法染色檢測(cè)視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)核層中PTEN和P-PTEN的表達(dá)。用計(jì)算機(jī)圖像分析工作站Motic image advanced 3.2分析表達(dá)區(qū)域的平均灰度值后再用統(tǒng)計(jì)軟件spss 12.0分析處理數(shù)據(jù)。 結(jié)果:PTEN和P
3、-PTEN在正常視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)核層都有表達(dá)。與正常組相比,PTEN在1天組直到9天組的節(jié)細(xì)胞層和7-9天組內(nèi)核層表達(dá)都顯著增加(P<0.01)。在視神經(jīng)夾挫傷后從6小時(shí)組、1天組、7-14天組的節(jié)細(xì)胞層以及6小時(shí)組、1天組、7天組、9天組的內(nèi)核層,P-PTEN的表達(dá)都顯著增加(P<0.01)。28天組的P-PTEN在節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)核層的表達(dá)較正常明顯降低(P<0.05)。假手術(shù)組和正常對(duì)照組灰度值比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。 結(jié)論:PT
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