一株對蝦腸道益生菌的篩選及其作用機(jī)理和應(yīng)用效果的研究.pdf

1、本文以益生性和安全性為篩選標(biāo)準(zhǔn)，從白斑病毒耐過中國明對蝦腸道中分離到一株對蝦專用益生菌，并對其作用機(jī)理和應(yīng)用效果進(jìn)行了研究。在此基礎(chǔ)上探討了該菌株的多種配伍及其應(yīng)用效果。 研究了從白斑病毒(WSSV)耐過中國明對蝦(Fenneropenaeus chinens&)腸道中分離的一株海洋細(xì)菌B12的益生特性和安全性，并結(jié)合形態(tài)觀察、生理生化特征和16S rDNA序列分析對菌株B12進(jìn)行了分類鑒定。研究結(jié)果表明：菌株B12是一株安全的

2、益生菌株。鑒定結(jié)果證實(shí)B12為嗜鹽單胞菌屬.Halomonassp.。 研究了不同給予方式(浸浴或口服)，不同給予時間(間隔或連續(xù))，不同添加劑量和不同添加形式(活菌或滅活菌)的益生菌B12對中國明對蝦幼體、中國明對蝦稚蝦或養(yǎng)成期日本囊對蝦(Marsupenaeus japonicus)成活率、免疫力、抗病力、腸道菌群組成、中腸組織結(jié)構(gòu)或養(yǎng)殖水體水質(zhì)的影響，并分別從免疫學(xué)、腸道微生物學(xué)和組織學(xué)的角度，探討益生菌B12對對蝦的作用

3、機(jī)理。研究結(jié)果表明，益生菌B12可以有效地調(diào)節(jié)對蝦腸道微生物菌群組成，激活對蝦免疫反應(yīng)，改善中國對蝦幼體培育水體水質(zhì)，提高中國明對蝦幼體的成活率和對副溶血弧菌的抗病力，提高中國明對蝦對白斑病毒的抗病力。 飼料中添加7.18×10<'10> cfu g<'-1>濃度的益生菌B12更有利于改善中國明對蝦的健康狀況。10<'7> cfu ml<'-1>濃度的益生菌B12浸浴處理，能夠提高中國明對蝦幼體的成活率，調(diào)節(jié)幼體的免疫反應(yīng)，改善

4、培育水體的水質(zhì)，從而在中國明對蝦育苗中發(fā)揮益生作用。益生菌B12和植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)激活日本囊對蝦免疫反應(yīng)需要的時間和對日本囊對蝦免疫反應(yīng)影響的程度均有種屬特異性。這兩株益生菌的活菌和熱滅活形式均能顯著激活日本囊對蝦的免疫反應(yīng)，益生菌B12的活菌形式能夠延長激活日本囊對蝦免疫反應(yīng)的時間，滅活乳酸菌添加組日本囊對蝦的免疫水平會逐漸高于活的乳酸菌添加組。飼料中添加不同類型的益生菌改變了日本囊對蝦腸道

5、中的微生態(tài)菌群組成，不同種類益生菌添加組日本囊對蝦腸道優(yōu)勢菌群的數(shù)量和種類存在顯著差異。同種細(xì)菌的活菌和熱滅活菌對日本囊對蝦腸道優(yōu)勢菌群的數(shù)量和種類的影響也不同。飼料中添加不同種類的益生菌的活菌和滅活形式均有利于維護(hù)日本囊對蝦腸道粘膜結(jié)構(gòu)的完整性。飼料中持續(xù)添加益生菌B12能夠維護(hù)日本囊對蝦中腸組織學(xué)結(jié)構(gòu)的完整性。水體中添加復(fù)合益生菌或合生元有利于提高中國明對蝦幼體的成活率、改善中國明對蝦幼體培育水體水質(zhì)和加強(qiáng)中國明對蝦幼體的免疫反應(yīng)，

6、復(fù)合益生菌或合生元在中國明對蝦育苗中發(fā)揮了較好的益生作用。飼料中添加復(fù)合益生菌與果寡糖和商品復(fù)合酶制劑的復(fù)合形式顯著提高了中國明對蝦幼體的成活率(且顯著高于其他處理組)(P<0.05)，顯著激活了中國明對蝦幼體的免疫反應(yīng)(P<0.05)，而且顯著降低了幼體培育水體中氨氮的濃度(P<0.05)，表現(xiàn)了較好的復(fù)合益生效果，是本研究中最優(yōu)的功能性復(fù)合制劑的組合。總之，本研究從免疫學(xué)、腸道微生物學(xué)和組織學(xué)的角度，探討益生菌B12的作用機(jī)理，并對