CE對膽堿能系統(tǒng)損傷致癡呆大鼠的藥效學作用及其作用機制的探討.pdf

1、老年性癡呆癥亦稱阿爾茨海默病（Alzheimer's disease，AD），是一種以記憶減退，認知障礙，人格改變?yōu)樘卣鞯纳窠浲诵行约膊?。AD是老年人群中進行性癡呆的最主要原因，隨著人口老齡化，老年癡呆癥的危害性日益嚴重。該病病因仍不十分清楚，目前多數(shù)學者認為中樞膽堿能系統(tǒng)功能損傷是造成AD病人認知記憶障礙的重要因素。目前，臨床上尚無滿意的治療藥物，因此，探索AD的病因，尋找治療AD的有效藥物是當務之需。
　　 本組在研究中藥治

2、療老年性癡呆時，發(fā)現(xiàn)長苞凹舌蘭[Coeloglossum.viride（L.）Hartm.Var.bracteatum（Willd.）Richter，藏名旺拉]提取物CE，可以改善多種擬癡呆小鼠、大鼠的學習記憶障礙。本實驗采用立體定位技術將鵝蒿蕈氨酸（IBO）（2μl，8μg/μl）單側注射入Meynert基底核（nbM）建立膽堿能損傷致癡呆大鼠模型，用Morris水迷宮實驗和跳臺實驗測試大鼠的學習記憶能力，以觀察不同膽堿能系統(tǒng)損傷對動

3、物的學習記憶能力的影響，以及CE對學習記憶功能障礙的改善作用。為進一步探討CE的作用機制，同時觀察了CE對IBO誘導癡呆大鼠右側膽堿能系統(tǒng)相關的腦區(qū)：皮層、海馬和紋狀體的乙酰膽堿酯酶（acetylcholinesterase，AChE）、膽堿乙酰轉移酶（choline acetyltransferase，ChAT）、神經生長因子（nerve growth factor，NGF）和NGF受體酪氨酸激酶（tyrosine kinase，Tr

4、kA）的表達。
　　 雄性SD大鼠隨機分為4組，即正常對照組，左側損傷組，右側損傷組，右側損傷+給藥組（5mg/kg），手術前1小時灌胃給藥，術后每日給藥一次，直至行為學測試結束。
　　 Morris水迷宮實驗結果提示：將IBO注射進入單側nbM，可以造成大鼠的空間學習和記憶功能障礙，大鼠表現(xiàn)出明顯的擬癡呆的癥狀。這說明模型制作成功。單側損傷大鼠nbM對其空間學習記憶的影響不同，并且右側損傷組的空間學習記憶能力障礙更為嚴

5、重。給予CE，右側損傷+給藥組的大鼠找到平臺的時間明顯縮短，說明CE明顯的提高了nbM右側損傷的大鼠空間學習和記憶能力，對其擬癡呆癥狀具有明顯的改善作用。
　　 跳臺實驗結果顯示：與正常對照組相比，左側損傷組和右側損傷組的大鼠3分鐘內跳下平臺的潛伏期都有縮短，說明其記憶能力受損，但無統(tǒng)計學上的差異，可能和動物的回避反應的個體差異較大有關。與損傷組相比，給予CE，右側損傷+給藥組的潛伏期有延長，顯示出CE對記憶能力障礙的改善作用。

6、說明在記憶的保留上，CE在右側膽堿能系統(tǒng)損傷模型上表現(xiàn)出一定的保護作用。
　　 利用western blotting技術檢測大鼠右側膽堿能系統(tǒng)不同腦區(qū)的蛋白含量，結果如下表。以每次實驗中每組的內對照β-actin條帶的密度校準每個條帶的密度。再以正常對照組的校準密度值計為100％，其余各組以正常對照組校準密度值的百分率表示。目的蛋白表達量（％ of control）=各組校準條帶密度/正常對照組校準條帶密度×100％。
　

7、　 綜合以上結果，我們得出結論：
　　 （1）IBO損傷大鼠左側或者右側的基底前腦meynert核，都能造成其學習記憶能力障礙。這種學習記憶能力障礙可能是由于nbM損傷造成的膽堿能系統(tǒng)的病理性改變所引起。模型大鼠的海馬內AChE的含量過高造成其中乙酰膽堿水平下降可能是大鼠學習記憶能力減退的主要原因之一。
　　 （2）CE對nbM損傷造成的動物的學習記憶功能障礙有改善作用；對nbM損傷造成的相關蛋白表達異常有改善作用，其