遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理誘導(dǎo)腦保護(hù)的作用研究來(lái)自Notch、S-100B、NSE觀察的證據(jù).pdf

1、腦卒中(stroke)是一種突然起病的腦血液循環(huán)障礙性疾病。隨著外科技術(shù)的推廣應(yīng)用，重要臟器的手術(shù)越來(lái)越多，圍手術(shù)期腦卒中的發(fā)生率也隨之增加，腦的缺血再灌注損傷是其最主要原因，雖然臨床上目前使用很多措施但效果不理想。尤其是心臟手術(shù)后腦損傷發(fā)生率較高，表現(xiàn)為一系列的腦功能紊亂，如中風(fēng)、腦病及認(rèn)知功能下降等。其中中風(fēng)的發(fā)生率為1％～3％，而認(rèn)知功能障礙的發(fā)生率在術(shù)后1月可高達(dá)30％～65％，在術(shù)后5月仍有20％～40％。體外循環(huán)狀態(tài)下腦的栓

2、塞和血流灌注不足所致的腦缺血/再灌注損傷被認(rèn)為是術(shù)后腦損傷的主要原因。
　　近年研究發(fā)現(xiàn)肢體遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理對(duì)腦和脊髓具有保護(hù)作用，可以明顯減輕缺血再灌注導(dǎo)致的神經(jīng)組織損傷。由于遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理是一種簡(jiǎn)單、安全的預(yù)處理方式，與經(jīng)典缺血預(yù)處理相比，更能方便安全地應(yīng)用于臨床患者。研究發(fā)現(xiàn)，生物體內(nèi)普遍存在高度保守的Notch信號(hào)通路，Notch信號(hào)在神經(jīng)系統(tǒng)中與神經(jīng)元分化、成熟、再生、功能形成、以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病存在著密切的關(guān)系。那么，No

3、tch信號(hào)通路是否參與了遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理誘導(dǎo)神經(jīng)保護(hù)過(guò)程？神經(jīng)組織細(xì)胞在缺血遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理過(guò)程中具有何種反應(yīng)？這些都是有待闡明的相關(guān)機(jī)制問(wèn)題。本研究對(duì)于以上問(wèn)題進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，提供了遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理誘導(dǎo)腦保護(hù)機(jī)制的Notch、S-100B、NSE初步證據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)一遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理誘導(dǎo)腦保護(hù)與Notch分子表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：探討Notch信號(hào)在遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理誘導(dǎo)腦保護(hù)效應(yīng)的可能參與作用。方法：采用大腦中動(dòng)脈阻閉（MC

4、AO）法制備大鼠局灶性腦缺血模型，將36只雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)、MCAO組和肢體遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理（RIPC）組+MCAO組（n=10），分別觀察各組大鼠腦梗死灶的大小和神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分，并用免疫組織化學(xué)染色以及Western blot、Real-Time PCR檢測(cè)再灌注2h、24h、72h大鼠腦組織紋狀體區(qū)Notch信號(hào)通路中NICD（Notch intracellular domain）及靶基因HES-1表達(dá)的變化。

5、結(jié)果：1.RIPC組腦梗死容積小于MCAO組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。2.其神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分也明顯優(yōu)于MCAO組（P＜0.05）。3.免疫熒光：RIPC組2h、24hNICD表達(dá)明顯少于MCAO組。4.Western blot：RIPC組NICD表達(dá)量在再灌注2h、24h降低，MCAO組NICD表達(dá)量在再灌注2h、24h強(qiáng)于同時(shí)間點(diǎn)RIPC組（P＜0.05），但兩組均高于假手術(shù)組（P＜0.05）。5.Real-Time PCR：受

6、體Notch-1 mRNA表達(dá)在MCAO組再灌注2h、24h增高，RIPC組Notch-1表達(dá)量在再灌注2h、24h低于同時(shí)間點(diǎn)MCAO組（P＜0.05），靶基因HES-1mRNA表達(dá)MCAO組在再灌注2h、24h逐步增高，RIPC組表達(dá)量在再灌注2h、24h低于同時(shí)間點(diǎn)MCAO組（P＜0.05）。但再灌注72h兩組表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論：肢體遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理對(duì)腦的缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，肢體遠(yuǎn)程預(yù)處理可以使Notch信號(hào)通路相關(guān)分

7、子Notch-1、NICD、HES-1表達(dá)發(fā)生變化，肢體遠(yuǎn)程預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受的機(jī)制可能與Notch信號(hào)表達(dá)下降有關(guān)。
　　實(shí)驗(yàn)二遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理對(duì)心臟圍手術(shù)期腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用研究
　　目的：觀察遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理對(duì)心臟手術(shù)體外循環(huán)（CPB）所致腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其檢測(cè)評(píng)價(jià)。方法：80例擇期行心臟瓣膜置換術(shù)患者在麻醉誘導(dǎo)前隨機(jī)分成兩組：肢體遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理組和對(duì)照組，每組各40例。肢體遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理使用充氣式止血

8、帶對(duì)右上肢實(shí)施3次5分鐘缺血、5分鐘再灌注，充氣壓力為200mmHg。檢測(cè)麻醉誘導(dǎo)前、CPB前、術(shù)畢及開(kāi)放后6、24、48、72h血清S-100B和神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）濃度。術(shù)前及術(shù)后1W、3M、6M進(jìn)行認(rèn)知功能評(píng)估。結(jié)果：遠(yuǎn)程缺血預(yù)處理組開(kāi)放后6、24、48、72h血清S-100B和開(kāi)放后24、48、72h的NSE釋放明顯減少（P＜0.05）。盡管兩組患者認(rèn)知功能評(píng)估雖不統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但遠(yuǎn)程預(yù)處理組評(píng)分優(yōu)于對(duì)照組。結(jié)論：肢體遠(yuǎn)