圍心跳驟停期的遠程缺血處理誘導(dǎo)大鼠內(nèi)源性腦保護的實驗研究.pdf

1、本文主要從以下幾部分進行論述：
　　第一部分:
　　目的:通過夾閉氣管導(dǎo)管建立穩(wěn)定的大鼠窒息性心跳驟停模型。
　　方法:選用30只清潔級雄性SD大鼠，體重(200-300)g，麻醉后行動、靜脈及氣管插管，于呼氣末夾閉氣管導(dǎo)管，待收縮壓≤25mmHg，5min后開始心肺復(fù)蘇。
　　結(jié)果:夾閉氣管導(dǎo)管后(266.58±40.28)s，大鼠均達到心跳驟停標準，28例恢復(fù)自主循環(huán)，未恢復(fù)2例，心肺復(fù)蘇成功率93.3％。<

2、br>　　結(jié)論:該模型穩(wěn)定，操作簡單，心肺復(fù)蘇成功率高，能夠滿足后續(xù)實驗研究的需要。
　　第二部分:
　　目的:探討大鼠心跳驟停及復(fù)蘇過程中腦損傷的程度及機制。
　　方法:選用清潔級雄性SD大鼠16只，隨機分為假手術(shù)組(Sham)和心肺復(fù)蘇組(CA/CPR)。采用窒息法建立大鼠心跳驟停模型。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、S100β蛋白水平;蛋白免疫印記法(Western Blot

3、)檢測海馬凋亡蛋白bax、bcl-2、caspase-3表達;原位末端轉(zhuǎn)移酶標記法(TUNEL)檢測神經(jīng)凋亡細胞并觀察大鼠腦形態(tài)學(xué)改變。
　　結(jié)果:與Sham組比較，CA/CPR組S100β在0、3、6h含量均較高，NSE在6h較高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。CA/CPR組NSE、S100β蛋白水平呈上升趨勢，S100β升高在0、3h差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與Sham組比較，CA/CPR組bax、caspase

4、-3表達增高，而bcl-2表達降低，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。CA/CPR組神經(jīng)元凋亡率較Sham組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。腦組織形態(tài)學(xué)改變以CA/CPR組更明顯。
　　結(jié)論:心跳驟停5min及復(fù)蘇成功的大鼠腦損傷比較明顯，且隨時間逐漸加重，可能與觸發(fā)凋亡機制有關(guān)。
　　第三部分:
　　目的:研究圍心跳驟停期遠程缺血處理對大鼠腦損傷的保護作用。
　　方法:選用清潔級雄性SD大鼠40只，隨機

5、分成假手術(shù)組(Sham)，心肺復(fù)蘇組(CA/CPR)，遠程缺血預(yù)處理組(RIPC)，遠程缺血期處理組(RPC)及遠程缺血后處理組(RI-PostC)。ELISA檢測血清中NSE、S100β蛋白水平;WesternBlot檢測海馬凋亡蛋白bax、bcl-2、caspase-3的表達;TUNEL檢測神經(jīng)凋亡細胞并觀察腦形態(tài)學(xué)改變。
　　結(jié)果:與CA/CPR組比較，RIPC組S100β在0、3、6h含量均較低，NSE在6h較低，差異均有

6、統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與CA/CPR組比較，RIPC組和RI-PostC組的bax和caspase-3蛋白表達降低，而bcl-2表達上升，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); RIPC組caspase-3低于RI-PostC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。缺血處理組神經(jīng)細胞凋亡率明顯低于CA/CPR組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，且以RIPC組最小。缺血處理組腦形態(tài)學(xué)改變較CA/CPR組均減輕。
　　結(jié)論:RIP