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文檔簡介
1、目的
以中濃度氧(60%)暴露下新生小鼠為對象制作支氣管肺發(fā)育不良(Bronchopulmonarydysplasia,BPD)的動(dòng)物模型,研究中濃度氧暴露對新生小鼠肺部發(fā)育的影響,并檢測BPD小鼠血清內(nèi)Clara細(xì)胞分泌蛋白(CCSP)水平表達(dá),為BPD的早期診斷、治療、預(yù)后提供一條新路徑。
方法
將120只清潔級4日齡新生昆明小鼠,隨機(jī)分為2組:空氣組和氧氣組,60只/組。氧氣組小鼠置于氧濃度為60%的
2、氧氣箱中,空氣組小鼠放于空氣箱中,構(gòu)建BPD小鼠模型;分別于實(shí)驗(yàn)開始后的不同時(shí)間點(diǎn):第7d、14d、21d和28d,于氧氣組和空氣組分別隨機(jī)選取12只新生小鼠,稱重后,應(yīng)用摘眼球法留取血標(biāo)本,采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中CCSP水平的表達(dá);再分離肺組織,通過HE染色后觀察肺組織的形態(tài)學(xué)變化,通過計(jì)算放射狀肺泡計(jì)數(shù)(RAC)顯示肺泡的數(shù)量,通過雙盲法進(jìn)行肺組織纖維化評分,測量呼吸膜的厚度。
結(jié)果
1.對新生小鼠一般狀態(tài)
3、的影響:空氣組表現(xiàn)為皮下脂肪豐滿、反應(yīng)敏捷、活潑好動(dòng)、發(fā)育良好;氧氣組小鼠變得皮膚干燥、精神不振、少動(dòng)、消瘦、發(fā)育緩慢、呼吸急促和青紫。
2.中濃度氧暴露下肺的形態(tài)學(xué)變化:中濃度氧暴露下第21d氧氣組肺組織中肺泡腔顯著增大,出現(xiàn)肺泡融合;正常的肺泡結(jié)構(gòu)消失,放射狀肺泡計(jì)數(shù)減少(P<0.01);肺間質(zhì)細(xì)胞增加、膠原纖維增生明顯(P<0.01);呼吸膜增厚(P<0.01)。
3.空氣組血清中CCSP水平在各時(shí)間點(diǎn)無顯著性
4、變化,平均值波動(dòng)在14.97ng/L-17.54ng/L(P>0.05)之間。氧氣組小鼠血清中CCSP表達(dá)水平在吸氧第14d顯著高于空氣組(P<0.01),隨著吸氧時(shí)間的延長,于第21d和第28d氧氣組小鼠血清中CCSP表達(dá)水平顯著低于空氣組(P<0.01),且顯著低于本組第14d的水平(P<0.01)。
結(jié)論
1.長期吸入60%中濃度氧可引起新生鼠肺組織損傷和肺發(fā)育阻滯,出現(xiàn)肺泡發(fā)育障礙和肺組織纖維增生,與人發(fā)生的
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