雌性食蟹猴子宮移植的實驗研究.pdf

1、背景
　　由于子宮畸形、子宮切除及子宮無功能等原因?qū)е碌牟辉蟹Q為子宮源性不孕。對多數(shù)子宮源性不孕患者來說,孕育子女成為極其奢望的事情。近年來,代孕母親成為解決子宮源性不孕患者的希望,但由于其在倫理方面存在爭議,大多數(shù)國家法律都明確禁止代孕技術(shù)。隨著器官移植技術(shù)的成熟發(fā)展,子宮移植成為可能,也是解決子宮源性不孕的有效方法。近年來,很多外國學(xué)者開展了子宮移植的動物實驗,但國內(nèi)相關(guān)研究開展較少。對于子宮移植來說,還存在很多難題,需要解決

2、移植手術(shù)技術(shù)相關(guān)問題,免疫抑制與排斥問題,移植子宮妊娠及分娩和胎兒生長發(fā)育相關(guān)問題。而在子宮移植手術(shù)中,術(shù)中出血量、手術(shù)時間、術(shù)后并發(fā)癥等決定了移植后手術(shù)對象的短期和長期生存率。本課題選取非人類靈長類動物雌性食蟹猴作為實驗對象,在子宮組織冷缺血保存研究、組織配型研究的基礎(chǔ)上,主要對移植手術(shù)技術(shù)的可行性進(jìn)行前期研究,來探討移植前后實驗動物的結(jié)局和子宮組織的改變,為將來的人類子宮一直技術(shù)積累數(shù)據(jù)和經(jīng)驗,并提供可能的參考。
　　目的：<

3、br>　　通過搜集雌性食蟹猴子宮自體移植、雌性食蟹猴同種異體子宮原位移植的手術(shù)相關(guān)數(shù)據(jù),包括手術(shù)時間、實驗動物結(jié)局、術(shù)后組織病理結(jié)果等,來研究移植后子宮在形態(tài)學(xué)、組織學(xué)、血液學(xué)、免疫學(xué)、生理學(xué)、形態(tài)學(xué)和病理學(xué)等方面的變化,探討手術(shù)可行性,為臨床開展相關(guān)手術(shù)提供參考依據(jù)。
　　(一)雌性食蟹猴子宮自體移植的實驗研究
　　方法：
　　8只育齡非懷孕雌性食蟹猴,年齡4～7歲,體重4.5~5.1kg,均有生育史。常溫下單籠飼養(yǎng)

4、,自由進(jìn)水進(jìn)食。實驗動物均由華南靈長類動物研究所提供[SCXK(粵)2009-0010]。8例中,4例用于解剖研究,4例行子宮自體移植術(shù)。主要通過一下方法探討手術(shù)可行性:
　　1、記錄實驗猴結(jié)局,及術(shù)中相關(guān)數(shù)據(jù)記錄;
　　2、記錄實驗動物月經(jīng)周期觀察結(jié)果,與實驗動物術(shù)后月經(jīng)情況觀察結(jié)果做對比;
　　3、實驗動物術(shù)后1周剖腹探查,并記錄探查結(jié)果。
　　結(jié)果：
　　8只雌性食蟹猴中,4只用于預(yù)實驗解剖研究,行開

5、腹探查術(shù),術(shù)程順利,術(shù)后觀察一個月,實驗動物均恢復(fù)良好;4只雌性食蟹猴行子宮自體移植術(shù),其中1例術(shù)中死亡,3例術(shù)程順利,術(shù)后實驗動物均存活至一個月以上。
　　8只雌性食蟹猴月經(jīng)周期為24～31天,平均27.17±2.06天;月經(jīng)出血時間2～3天,平均2.56±0.40天。對3例行子宮自體移植術(shù)的雌性食蟹猴,于術(shù)后觀察1個月,均未觀察到正常月經(jīng)血。
　　4只雌性食蟹猴行子宮自體移植術(shù),其中3只存活至術(shù)后1個月以上,一般情況好,

6、均無術(shù)后吻合口破裂滲漏、宮腔出血和宮腔感染等術(shù)后并發(fā)癥。于術(shù)后4周行剖腹探查術(shù),術(shù)中見:腹膜與腸管、輸尿管、膀胱均有粘連,子宮均失去正常的倒梨形形態(tài),呈現(xiàn)不同程度的萎縮。
　　比較子宮動脈在活體中的測量值和在子宮離體冷缺血狀態(tài)時的測量值,差異顯著(P<0.01);比較卵巢靜脈在活體中的測量值和在子宮離體冷缺血狀態(tài)時的測量值,差異顯著(P<0.01);比較活體中子宮動脈和卵巢靜脈的測量值,差異顯著(P<0.01);比較子宮離體冷缺血

7、狀態(tài)時子宮動脈和卵巢靜脈管徑的測量,無顯著性差異(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　雌性食蟹猴在生殖生理方面與人類相似,在內(nèi)生殖系統(tǒng)解剖方面的差異較小,是人類婦科疾病的發(fā)生機(jī)理、治療方式等理想的實驗動物;雌性食蟹猴子宮自體移植術(shù)后生理學(xué)指標(biāo)變化與人類器官移植相比基本相似,子宮自體移植手術(shù)技術(shù),尤其是血管吻合技術(shù)不成熟,導(dǎo)致術(shù)后子宮不同程度的萎縮,為進(jìn)一步開展同種異體子宮移植手術(shù)提供了一定的參考依據(jù)。
　　(二)雌性食蟹

8、猴同種異體子宮原位移植的實驗研究
　　方法：
　　20只非懷孕雌性食蟹猴,年齡3.5~9歲,體重3.7～5.9kg,均有生育史。常溫下飼養(yǎng),自由進(jìn)水進(jìn)食。實驗動物均由華南靈長類動物研究所提供[SCXK(粵)2009-0010]。經(jīng)血型相容性試驗和混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)試驗,選出最匹配實驗動物A和B互為供體和受體進(jìn)行同種異體子宮移植手術(shù)(實驗動物A和B血型交叉試驗為陰性,交叉淋巴細(xì)胞試驗結(jié)果小于1％),術(shù)后4周剖腹探查觀察子宮成活情

9、況,死亡猴只立即行尸體解剖。分別切取正常子宮組織、死亡猴只尸解子宮組織及存活猴只術(shù)后4周剖腹探查子宮組織分別做病理檢查。
　　結(jié)果：
　　2例雌性食蟹猴同種異體子宮原位移植手術(shù),術(shù)中均無神經(jīng)和盆腔臟器損傷等并發(fā)癥發(fā)生,均未輸血。麻醉效果滿意,術(shù)中監(jiān)護(hù)指標(biāo)正常。1例術(shù)后48小時內(nèi)死亡,1例術(shù)后4周剖腹探查,結(jié)合尸檢和剖腹探查的子宮大體、病理檢查結(jié)果可見:早期死亡病例子宮組織可見炎性細(xì)胞浸潤及散在出血點;術(shù)后1個月剖腹探查可見不