一氧化碳抑制糖原合酶激酶3β信號傳導改善葡聚糖硫酸鈉誘導結腸炎.pdf

1、目的：本實驗主要探討一氧化碳（CO）通過抑制糖原合酶激酶3β（GSK3β）的信號傳導從而改善葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導的急性結腸炎的機制。
　　方法：首先將50只7周齡雄性C57BL/6小鼠隨機分為兩批，每一批25只，隨機分為5組,即對照組、DSS組、DSS+CO組、DSS+LiCl組與CO組，每組5只。其中，DSS，DSS+CO以及DSS+LiCl組的小鼠飲用3％ DSS，6天后轉喂高壓滅菌水。而對照組與CO組始終飲用高壓滅菌水

2、。隨后我們將CO組與DSS+CO組的小鼠放入密閉箱使其吸入250ppm的一氧化碳，每日4小時，而對DSS+LiCl組的小鼠則每日施行腹腔內注射氯化鋰（LiCl）200mg/kg。其中對第一批小鼠我們記錄其12天的生存率。而對于第二批小鼠，當實驗進行到第10天，我們將小鼠處死并取出結腸做組織檢查與mRNA和蛋白質表達分析。與此同時，從第二批小鼠的腸系膜和脛骨中提取淋巴結細胞與骨髓衍生巨噬細胞（BMMs），分析細胞中促炎性細胞因子的mRNA

3、與蛋白質表達。在體外，我們主要培育U937人類單核細胞株與腸系膜淋巴結細胞（MLNs）。我們首先用一氧化碳釋放分子2（CORM2）和氯化鋰對這兩種細胞施行30分鐘的預處理，隨后通過30分鐘的脂多糖（LPS）刺激分析細胞中促炎性細胞因子的mRNA與蛋白質的表達。
　　結果：在體內實驗中，DSS組的小鼠生存率顯著下降，并在結腸組織，MLNs與BMMs細胞中促炎性細胞因子，如：腫瘤壞死因子（TNFα），誘導型一氧化氮合成酶（iNOS）的

4、表達顯著增高。然而通過吸入一氧化碳，TNFα與iNOS的表達顯著減少，并且通過對 GSK3β的第9位絲氨酸殘基磷酸化而使其失活。我們通過組織學檢查也發(fā)現(xiàn)一氧化碳可改善由 DSS損傷的結腸組織。在體外實驗中也發(fā)現(xiàn)，CORM2可抑制LPS誘導的促炎性細胞因子的表達，以及GSK3β的信號傳導。
　　結論：通過研究一氧化碳的抗炎作用，我們發(fā)現(xiàn)一氧化碳可抑制GSK3β的活性及其信號傳導從而改善由 DSS誘導的急性結腸炎。并且揭示了一氧化碳對