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文檔簡介
1、目的:建立慢性低氧高二氧化碳模型大鼠,觀察海馬膽堿能系統(tǒng)變化,探討慢性低氧高二氧化碳模型大鼠記憶障礙是否與腦內(nèi)膽堿能系統(tǒng)變化有關(guān)。
方法:將48只SD大鼠用隨機數(shù)字表法分為對照組、低氧高二氧化碳2周組、低氧高二氧化碳4周組,每組各16只。建立慢性低氧高二氧化碳大鼠模型,低氧高二氧化碳實驗組置于低氧高二氧化碳艙中(吸入氣O2濃度為9%~11%,CO2濃度為5%~6%),每天8小時,每周6天;其余時間同對照組于正常環(huán)境中飼養(yǎng)。
2、八臂迷宮檢測大鼠記憶能力,HE染色和尼式染色觀察海馬形態(tài),比色法檢測海馬乙酰膽堿(acetylcholine,ACh)含量、乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活性、膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(choline acetyl transferase,ChAT)活性,Western blot法檢測海馬煙堿型乙酰膽堿受體α7亞型(α7 nicotinicacetylcholine receptor,α7 nAchR)蛋白表達
3、。
結(jié)果:
1.與對照組相比,2周組大鼠記憶能力下降,以工作記憶損害為主;與2周組相比,4周組大鼠記憶能力下降,以工作記憶損害為主。
2.HE染色發(fā)現(xiàn)對照組大鼠海馬錐體細(xì)胞排列有序,細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,細(xì)胞間質(zhì)均勻,偶見壞死細(xì)胞;2周組大鼠海馬錐體細(xì)胞排列紊亂,細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊,細(xì)胞形狀不規(guī)則,間質(zhì)出現(xiàn)水腫,壞死細(xì)胞較多,以及不同程度的核質(zhì)深染、細(xì)胞皺縮。4周組上述改變較2周組變化更明顯。
4、3.尼式染色發(fā)現(xiàn)對照組尼式體較大且數(shù)量豐富,著色較深,2周組尼式體數(shù)量減少,4周組較2周組更明顯。
4.對照組、2周組、4周組大鼠海馬ChAT活性分別為(127.1±8.6) U/g組織濕重、(90.4±6.9) U/g組織濕重和(55.6±6.0) U/g組織濕重;與對照組相比,2周組大鼠海馬ChAT活性下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.408;P<0.05);與2周組相比,4周組大鼠海馬ChAT活性下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義
5、(t=10.781;P<0.05)。
5.對照組、2周組、4周組大鼠海馬AChE活性分別為(0.326±0.019)U/mgprot、(0.247±0.020) U/mgprot和(0.170±0.019) U/mgprot;與對照組相比,2周組大鼠海馬AChE活性下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.139; P<0.05);與2周組相比,4周組大鼠海馬AChE活性下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.036; P<0.05)。
6、r> 6.對照組、2周組、4周組大鼠海馬ACh含量分別為(58.9±2.7)μg/mgprot、(47.4±3.2)μg/mgprot和(32.5±3.2)μg/mgprot。與對照組相比,2周組大鼠海馬ACh含量減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=7.674; P<0.05);與2周組相比,4周組大鼠海馬ACh含量減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.279; P<0.05)。
7.Western blot顯示大鼠海馬α7 nA
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